Analyses microbiologiques du lait

Introduction
Le but de ce TP est d’analyser la qualité microbiologique deux laits :
Le lait 1 qui correspond à un lait pasteurisé avec une DLC correcte (Date Limite de Consommation) et le lait deux qui correspond à un lait avec une DLC correcte mais ayant subi une rupture de la chaine du froid.

Dans un premier temps, nous devons préparer les échantillons de lait en effectuant des prélèvements de nos deux laits, ainsi que des dilutions.
On prélève donc 10mL de chacun des laits auxquels on ajoute 90mL d’eau peptonée. On obtient alors la dilution à 10-1 et à partir de celle-ci nous allons réaliser les différentes dilutions demandées :
Pour le lait 1, on effectue des dilutions à 10-2 et 10-3
Pour le lait 2, on effectue des dilutions de 10-2 à 10-4

Dans un second temps, nous allons devoir ensemencer les flores.

Tout d’abord, on ensemence la flore coliforme totale sur une gélose VRBL que l’on incube à 30°C pendant 24heures. On ensemence pour chaque lait 1mL des dilutions de 10-1 à 10-3.

On ensemence ensuite la flore coliforme thermo-tolérante sur une gélose VRBL que l’on incube à 44°C pendant 24 heures. Pour le lait 1 on ensemence 10-1 et 10-2, et pour le lait 2 uniquement 10-1.

Après on ensemence la flore mésophile aérobie sur une gélose PCA que l’on incube à 30°C pendant 72 heures. Pour le lait 1, on ensemence 10-3 à 10-6 et pour le lait 2 de 10-1 à 10-4.

Puis on ensemence la gélose Baird Parker pour rechercher des Staphylococcus à coagulase positive que l'on incubera à 37°C de 24 à 48 heures. Pour chaque lait on ensemence les dilutions à 10-1.

Enfin, on ensemence des géloses EMB pour rechercher des colonies E.coli que l'on incube à 37°C pendant 24 heures. Pour chaque lait, on ensemence les dilutions 10-1.

Dénombrement