Immunologie – Sujet n°1

Mots clés : hybridome T, souris transgénique TCR, diabète autoimmun

1- Vous disposez d'un hybridome T qui secrète de l'interleukine-2 lorsqu'il est incubé en présence de cellules présentatrices (cellules de rate) de souris BALB/c et d'hémagglutinine (HA) (une protéine transmembranaire du virus de l'influenza). Une série d'expériences a permis de déterminer que cet hybridome reconnaissait un peptide d'hémagglutinine de 13 acides aminés (aa de 126 à 138) lié aux molécules I-A(d). Décrivez brièvement ces expériences.

2- Quelles molécules de surface sont exprimées par cet hybridome T ? Justifiez brièvement vos réponses.

3- La cellule dont est issue cet hybridome T était elle un lymphocyte de phénotype auxiliaire ("helper") ou cytotoxique ? Pourquoi ?

4- Les gènes codant pour les chaînes α et β du récepteur de cet hybridome ont été clonés. La chaîne α utilise la région Vα11 et la chaîne β la région Vβ4. Ces gènes ont été introduits dans le génome d'une souris BALB/c donnant ainsi une souris transgénique appelée "anti-HA". Des cellules sanguines ont été prélevées chez cette souris transgénique et chez une souris BALB/c contrôle. Les lymphocytes CD4+ ont été purifiés à l'aide de billes magnétiques, puis analysés par cytofluorométrie de flux aprés double marquage avec des anticorps anti-Vα11 et anti-Vβ4 (Figure 1). Expliquez les différences de profils obtenus entre la souris transgénique et la souris contrôle non transgénique. Conclusions ?

5- Ces mêmes lymphocytes CD4+ ont été analysés aprés simple marquage avec des anticorps anti-Vα8 et anti Vβ6. La Figure 2 montre les profils obtenus avec une souris contrôle non transgénique. Etant donné les résultats de la Figure 1, quels profils obtient on avec une souris transgénique (complétez la Figure 2).

6- La souris transgénique dont il a été question au paragraphe précédent a été croisée avec une souris mutante appartenant à la souche syngénique "Wid". Comme les souris BALB/c, les