Coliformes totaux

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  • Publié le : 6 mai 2010
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DENOMBREMENT DES COLIFORMES TOTAUX :

Dans cette étude, on va travailler avec une membrane filtrante consistant à filtrer un volume donné de l’échantillon surmembrane qui est déposée sur un milieu sélectif avant incubation.

Mode opératoire :

On place l’entonnoir de filtration stérile sur la fiole à vide.
On place lamembrane filtrante stérile sur le disque poreux à l’embase de l’entonnoir.
L’ensemble est serré à une pompe à vide, une trompe à eau ou une simple pompe aspirante àmain.
On agite vigoureusement l’échantillon puis le volume choisi.
On prend la membrane par une pince flambée.
On la place sur le milieu de culture en do c, lasurface qui était en contact avec l’eau vers le haut.
Remarque : aucune bulle d’air ne doit exister entre la membrane et le milieu de culture.Incuber à 37 ° C pendant 48 heures.

Lecture des résultats :
Les colonies de coliformes totaux apparaissent rosâtres ou rouge brique.

Expression des résultats :Coliformes totaux /100 = A × 100
B F
A : nombre total de colonies coliformes comptées sur la membrane.B : la somme des quantités d’eau filtrées exprimée en ml.
F : facteur de dilution.

❖ DENOMBREMENT DES COLIFORMES FECAUX :

• Test présomptif :On procède de la même manière que pour les coliformes totaux et l’incubation se fait
à44 ° C pendant 24 à 48 h en utilisant un milieu de culture différent :tergitol-7-agar.

• Lecture des résultats :

Les colonies apparaissent jaunes résultant de l’absence de réduction de TTC par les
Coliformes.
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