Compte rendu chaine respiratoire
Étude de la chaine respiratoire
Introduction
Au court de ce TP nous avons cherchés à étudiés la chaîne respiratoire et ses composants ainsi que l’effet de 4 substances sur ces derniers. La phosphorylation oxydative via les mitochondries joue un rôle primordial dans la production d'énergie des cellules eucaryotes. La compréhension de cette chaine et de ces composants est majeure quand on veut étudier le métabolisme d’un organisme, mais aussi pour tous les aspects de la biologie car avoir de l'énergie directement utilisable par la cellule est nécessaire pour qui veut croitre.
Rappel
La chaîne respiratoire est donc la structure responsable de la phosphorylation oxydative. Elle est constituée de 5 complexes intégrés dans la membrane interne des mitochondries et qui on chacun des rôles différents comme l’indique le schéma ci-dessous:
Le complexe 1 est la NADH déshydrogénase,
Le complexe 2 est la succinate déshydrogénase (ou fumarate réductase)
Coenzyme Q / l’ubiquinone flavoprotéine pour le transport d’électrons
Principe et méthode
L’accepteur final d'électron étant l’oxygène (complexe 4), le fonctionnement de la chaîne respiratoire lors des diverses conditions expérimentales sera suivit en fonction de la variation de la concentration en O2 dans le milieu de suspension. Pour un tel suivi, on utilise un oxygraphe. Un oxygraphe est un appareil utilisant deux électrodes : une cathode en platine et une anode en argent entre lesquelles on maintient une différence de potentiel de 0,7V à l’aide d’une solution de KCl (conducteur). Elles sont recouvertes d’une membrane de téflon qui est en faite du polytétrafluoroéthylène. Correspondant à un polymère qui n’est perméable qu’à l’oxygène, laissant ainsi, l’eau et les ions de la solution tampon dans la suspension de mitochondrie. Par la suite le dioxygène passé à travers la membrane est réduit en ion hydroxyde et peroxyde d’hydrogène lui-même réduit en ions hydroxyde sous l’influence du potentiel