TP n°1 : Dosage de la vitamine C

1. Objectif
Titration visuelle en présence de DCPIP,
Détermination de la quantité d’acide ascorbique dans un orange.

2. principe
II s'agit d'un dosage volumétrique. On utilise comme oxydant le 2,6 dichlorophénol indophénol (DCPIP) qui possède deux propriétés caractéristiques :
Il oxyde la vitamine C en milieu acide il est coloré sous sa forme oxydée (rouge en milieu acide et bleu en milieu neutre) et incolore sous forme réduite.
Les demi-équations d'oxydoréduction de ce dosage sont :
Acide ascorbique 2H+ + 2e- + acide déhydroascorbique
Dichlorophénol - indophénol + 2H+ + 2e- leucodérivé réduit
+ 2H+ + 2 e-
2,6-DCPIP dérivé réduit

Bilan :
Acide ascorbique + 2,6-DCPIP acide déhydroascorbique + dérivé réduit

La vitamine C étant très oxydable, on utilise durant toutes les manipulations un stabilisant, l'acide métaphosphorique, qui ralentit son oxydation à l'air.
3. mode opératoire
Préparation des réactifs
a) Solution d’extraction
Dissoudre en agitant 15 g de granulés de PO3H glacial dans 200 mL d’eau
Diluer à 500 mL, filtrer rapidement sur papier dans un flacon en verre bouché.
b) Solution standard d’acide ascorbique (AH2) : 1 mg/mL
Peser exactement 50 mg de AH2 qui a été conservé au dessiccateur et à l’obscurité0
Transférer dans une fiole jaugée de 50 mL et diluer à ce volume immédiatement avant utilisation avec la solution de HPO3 – HOAc
c) Solution standard de 2,6 dichlorophénol endéphénol (DCPIP)
Dissoudre 50 mg de DCPIP dans 50 mL de H2O
Agiter vigoureusement, et lorsque le colorant est dissout, diluer à 20 mL avec H2O.
Filtrer à travers un papier filtre dans un flacon en verre rôdé.
Tenir toujours fermé, à l’abri de la lumière (flacon brun), et stocker au réfrigérateur.
Préparation de l’échantillon
Mixer le fruit (orange)
Filtrer sur coton
Ajouter des parties alycotes de 100 mL ou plus de jus préparé à des volumes égaux de HPO3 – HOAc
Désigner le volume total par V