Détermination du nombre de tyrosine de la caseine ß à partir du dosage, dans un hydrolisat, de la tyrosine libre.
La question que l’on se pose dans ce TP est: quel est la quantité de Tyrosine présente dans une protéine de caséine ß ? La gamme d’étalonnage établi et le dosage effectué avec le spectrophotomètre a permit de dresser un tableau indiquant la composition et l’absorbance de chaque échantillon de notre gamme étalon. Nous avons ensuite dressé la courbe d’étalonnage (absorbance en fonction de la concentration en tyrosine) qui nous a permis d'en déduire la concentration en tyrosine et le nombre de tyrosine à partir d’un hydrolysat de caséine d’absorbance connu.
Introduction: Le but de ce TP est de déterminer le nombre de tyrosine dans la protéine caseine ß .Pour cela un hydrolisat de caséine à été obtenu.
En effet il y a trop de liaison pour l'analyser, on rend donc la protéine linéaire et on hydrolyse (casser les liaisons) pour libérer le tyrosine. C'est à partir de cette solution que l'on va pouvoir déterminer le nombre de tyrosine contenues dans la caséine ß.
On effectue un dosage avec l'acide aminé et le réactif de Follin, en effet cette réaction donnera une coloration bleue qui permettra de faire un dosage colorimétrique.
Cela permettra ensuite de dresser une gamme d'étalonnage qui après analyse des résultats permet de définir la concentration massique de tyrosine et du nombre de tyrosine.
Les valeurs d'absorbance obtenue et regroupés dans le tableau de la gamme d'étalonnage (figure 1) varient en fonction de la concentration de tyrosine. On a obtenu en moyenne un rapport d'absorbance de 0,1 pour 10mg de tyrosine par litre. Les résultats obtenus sont plus ou moins précis en fonction de la qualité des manipulations effectuées. La courbe A=f(concentration de Tyr mg/L) obtenue a permit de définir la concentration en tyrosine des tubes 6 et 7 de solution d'hydrolisat de caséine mère et d'hydrolisat de caséine dilué de moitié.
Ce qui est normale puisque nous avons dilué de moitié la solution mère d'hydrolisat dans le tube 7 par rapport au