Passage de l’électrophorèse sur gel à l’électrophorèse capillaire
Dr Maurice Schmidt ADMED Analyses et diagnostics médicaux Neuchâtel-La Chaux-de-Fonds

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L’électrophorèse, une longue histoire de supports
• • • • • • • • En veine liquide (Tiselius 1930) Papier filtre (membrane) Acétate de cellulose (membrane) Amidon (milieu gélifié) Agar-agar (milieu gélifié) Agarose (milieu gélifié) Polyacrylamide (gel) Capillaire de silice (veine liquide, ∅ < 100 µm, l: 8 cm)

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Rappel des principes
• Charges des protéines
– Afin d’être solubles dans un phase aqueuse, toute molécule doit pouvoir s’entourer d’une couche de molécules d’eau. Dans le cas des protéines, cela dépend de leur capacité de ionisation. – Cette ionisation dépend majoritairement des radicaux d’aminoacides (R-COO- et R–NH3) présents à la surface des molécules. – Lorsque le pH du milieu est tel que le nombre de charges positives est égal au nombre de charges négatives, la protéine possède une charge globale nulle et ne migre pas lorsqu’elle est soumise à un champ électrique, c’est le point isoélectrique (pI). – Les électrophorèses des protéines sériques de routine sont en général réalisées en milieu alcalin (pH > 8, >9.5 en électrophorèse capillaire), les protéines sont donc chargées négativement. www.admed-ne.ch Electromigration
Toute espèce chargée en solution et soumise à un champ électrique E se déplace à une vitesse linéaire appelée vitesse électrophorétique Ve
Ve = µ x E, µ étant la mobilité électrophorétique de l’espèce dans le milieu considéré. Le transport des cations s’effectue dans le sens du champ E et le transport des anions dans le sens opposé.

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Facteurs influençant la migration
• La mobilité électrophorétique dépend de plusieurs facteurs:
– Charge électrique nette, celle-ci dépend de la différence entre le pH du milieu et le pI de chacune des particules – Intensité du champ électrique – Température –