LOWRY 1951

1) Solution X : [ 1 gr de muscle + 25 ml d’eau physiologique]
- Bien broyer avec le mortier
- Filtrer

N.B/ le broyage se fait au-dessus d’un accumulateur pour préserver les protéines.

2) 1 ml de la Solution X dans un Becher de 100 ml et compléter avec l’eau distillée en ajustant jusqu’à 100 ml Solution Y

3) On prend les tubes (style tube à essai) et on met 1 ml de la Solution Y dans chaque tubes (préserver à T = 4 ° C pour ne pas dénaturer les protéines)

4) Préparation de BSA (Serum Albumin Bovin) [0.025 gr de BSA dans 100 ml d’eau distillée]

5) Préparation du réactif de LOWRY (a+b) :

Solution a) Na OH 1 gr Dans 250 ml d’eau distillée Na2 CO3 5 gr

Solution b) Cu SO4 0.125 gr Dans 25 ml d’eau distillée Tetra Na +, K + 0.25 gr

a) Peser 1 gr de Na OH + 5 gr de Na2 CO3 pour préparer une solution de 250 ml b) Et 0.125 gr de CuSO4 + 0.25 gr de tetra Na +, K+ pour préparer 25 ml de solution.

Le réactif de Lowry est composé de :

Solution C [50 ml de Solution a + 5 ml de Solution b] à mélanger au moment de la manipulation
On prend 6 tubes pour la préparation BSA ( courbe d’étalonnage) et 6 tubes pour préparer la solution à doser. Pour les tubes de la BSA on prend dans le:

1er tube : 0.1 ml de la préparation 4) + 0.9 ml d’eau physiologique
2ème tube : 0.2 ml de la préparation 4) + 0.8 ml d’eau physiologique
3ème tube : 0.3 ml de la préparation 4) + 0.7 ml d’eau physiologique
4ème tube : 0.4 ml de la préparation 4) + 0.6 ml d’eau