Sommaire
I- Introduction
II- Objectif
III- Matériel biologique
IV- Description des étapes de la manipulation
1- Dissection
2- Pesage des organes
3- Broyage a- Définition b- Préparation α)- Tris HCL β)- EDTA γ)- β mercaptéthanol
4- Centrifugation
5- Congélation
6- Gamme Etalon a- Définition b- Principe α)-BSA β)-échantillon à étudier γ)-réactif de Bradford
7- Électrophorèse a- Définition b- Principe c- Préparation du gel polyacrylamide SDS d- Les % utilisé lors du TP e- Les solutions a préparé α)-tampon d’échantillon β)-tampon d’électrophorèse γ)-gel de séparation λ)-gel de concentration
V- traitement et analyse des résultats
1- Détermination des concentrations protéiques
2- Calcul du volume a prélevé
3- Dépôt sur puit
4- Analyse critique des volumes a prélevé
5- Migration
6- Coloration/décoloration a-coloration b-décoloration
7- Photo du gel
VI- Analyse du gel
1- Calcule de la mobilité relative des marqueurs
2- Courbe d’étalonnage des (MR) des marqueurs en fonction du log de leur masse molaire (MM)
VII- Interprétation
VIII- conclusion

I- Introduction :

L’organisme pluricellulaire est un être vivant formant un ensemble ordonnée et intégré.
Chaque type cellulaire est spécialisé pour accomplir une fonction bien spécifique.
Plusieurs facteurs sont responsables de cette spécificité citant :
La différentiation biochimique : pour cela on va étudier deux catégories de protéines nommées : protéine de luxe (spécifique) et protéine de ménage (non spécifique ).
I- Objectif :
L’étude des variations qualitatives et quantitatives du profil protéique de différents tissus chez les mammifères. pour notre TP on s’est bien focalisé sur la protéine spécifique et non spécifique des organes suivants :
Cœur, Muscle, Rate, Rein , Foie
II- Matériel biologique :
Il est constitué par des