génetique moleculaire
Chapitre 5 :
La transcription
Professeur Joël LUNARDI
Année universitaire 2010/2011
Université Joseph Fourier de Grenoble - Tous droits réservés.
Chapitre 5. La transcription
Chapitre 5. La transcription
5’ ---CGTTAACGTAGTCATCGT-----GCAATTGCATCAGTAGCA---5’
5’---CGUUAACGUAGUCAUCGU---
I. Transcription, ARN polymérase et matrice ADN
II. Mécanisme de la transcription
III. Maturation des ARN chez les eucaryotes
IV. Dégradation des ARN
V. Inhibiteurs de la transcription
Mise en évidence expérimentale
Mise en évidence expérimentale
1. Cellules cultivées en présence d’H d-thymidine et de P -uridine
3
32
ADN marqué par H3
ARN marqué par P32
2. Extraction et visualisation de l ’ADN et de l ’ARN par centrifugation sur un gradient de densité
radioactivité
dépôt acides nucléiques marqués au P32 et H3
ARN
ADN + ARN
densité
association ADN/ARN
I. ADN, ARN polymérase et transcription
I. ARN polymérase et ADN
Seul l ’ADN des gènes est transcrit grâce à une ARN polymérase ADN dépendante Chez les eucaryotes, la chromatine doit être dans une conformation « active », obtenue en particulier grâce à des modifications des histones
L ’ARN polymérase recopie le brin « + » de l’ADN en ARN
5’ ---CGTTAACGTAGTCATCGT--3’ ---GCAATTGCATCAGTAGCA---
5’ ---CGUUAACGUAGUCAUCGU---
brin + brin -
brin matrice
ARN = séquence du brin +
Un seul des 2 brins est transcrit par unité de transcription brin 5’
3’
5’
5’
3’ brin -
5’
L ’ARN polymérase catalyse la polymérisation du brin d’ARN
L ’ARN polymérase est un complexe protéique
ARN polymérase des bactéries liaison à l ’ADN
’
ARNm, ARNt, ARNr
reconnaissance du promoteur
site actif de l ’élongation
ARN polymérases des eucaryotes ( 5 à 10 su )
ARN pol I (nucléole)
ARN pol II (nucléoplasme)
ARN pol III (nucléoplasme)
ARNr
ARNm
ARNt
répétitions du motif