Hplc principe et bases
INTRODUCTION
I. Principe et Appareillage
1.1 Principe
1.2 Appareillage
II. Phases et Modes de séparation
2.1 Différentes phases stationnaires
2.2 Les différents modes de séparations
III. Les notions fondamentales
3.1 de temps
3.2 de concentration
3.3 d'efficacité
3.4 Qualité de la séparation
3.5 de pression
IV. Méthode de détermination des composes alpha-dicarbonylés du vin par HPLC après dérivation par le 1,2-diaminobenzene 13
4.1 Introduction
4.2 Domaine d'application
4.3 Principe
4.4 Réactifs et produits
4.5 Appareillage
4.6 Préparation de l'échantillon
4.7 Mode opératoire
4.8 Caractéristiques de la méthode HPLC
CONCLUSION
ANNEXES
BIBLIOGRAPHIE
INTRODUCTION Les méthodes HPLC représentent l’outil de séparation chromatographique le plus courant (à l’échelle analytique ou préparative). La transition entre la chromatographique en colonne et l’HPLC s’est faite grâce à la possibilité de fabriquer des particules de très faible taille (3 - 10 µm) et de granulométrie homogène, qui permettait de réaliser des colonnes très efficaces impliquant la nécessité d'employer des pompes à haute pression pour pousser les solvants (et des tubes résistants pour y mettre les phases stationnaires).
Dans un premier temps, nous présenterons le principe et l’appareillage de l’HPLC ainsi les différents modes de séparation. Nous développerons les notions fondamentales et nous finirons en illustrant la méthode par un exemple.
Principe et Appareillage Principe
La Chromatographie Liquide Haute Pression (ou Haute Performance) permet de séparer, d’identifier et de quantifier un ou plusieurs composés qui peuvent être dissous dans un liquide à des concentrations aussi faibles que l'état de traces (quelques ppm).
Les composés à séparer (solutés) sont mis en solution dans un solvant. Ce mélange est introduit dans un solvant (ou éluant), cela représente la phase mobile. Suivant