Hplc

1649 mots 7 pages

GENERALITES

CHROMATOGRAPHIE CHROMATOGRAPHIE EN PHASE LIQUIDE À HAUTE PERFORMANCE (HPLC)

PRINCIPE COMPOSITION

PHASE STATIONNAIRE PHASE MOBILE POMPE INJECTEURS COLONNES DETECTEURS CHROMATOGRAMME CONCLUSION

BIBLIOGRAPHIE

GENERALITES CHROMATOGRAPHIE La chromatographie permet la séparation ou la purification d·un ou de plusieurs composés d·un mélange en vue de leur identification et de leur quantification. C'est un ensemble de procédés, applicables à des mélanges moléculaires ou ioniques, basés sur des différences de distribution des solutés entre une phase stationnaire, généralement dispersée, et une phase mobile continue, les deux phases étant mises en contact intime et à contre courant.

CHROMATOGRAPHIE EN PHASE LIQUIDE À HAUTE PERFORMANCE (HPLC) La chromatographie en phase liquide a permis de réaliser des analyses qui n·étaient auparavant pas possible avec les techniques sur couche mince ou en phase gazeuse. A l·origine la chromatographie en phase liquide se faisait sur des colonnes en verre. Le liquide traversait la phase stationnaire par gravité ou sous faible pression. Puis pour augmenter le débit, des manipulations ont été réalisées sous pression plus forte. C·est ce que l·on a appeler la chromatographie liquide sous haute pression (HPLC). Très rapidement le P de pression est devenu le P de performance lorsque l·on a optimisé la technique (diminution de la taille de particules de la phase stationnaire, régularité de cette phase«).

PRINCIPE D·abord il y a la préparation de l·échantillon on le dissolvant dans un solvant, de façon à pouvoir l·introduire dans le système chromatographique, ici, le dispositif du HPLC. Ensuite il y a la mise en contact avec l·éluant, qui constitue la phase mobile, entraîné par une pompe à l·intérieur d·une colonne (contenant des grains de fine granulométrie), appelée phase stationnaire. C·est dans cette colonne que va se faire la séparation proprement

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