Immuno
- Immunodiffusion (Test d’Ouchterlony) - 1ere injection du lapin: injection sous cutanée
Dr Salam NASREDDINE
Dilution en série
Facteur du dilution (m final demandé / m initial) * volume totale = la qt prélevée du solution mère
Masse initiale x facteur de dilution = masse obtenue
L’immunoprécipitation:
A-L’immunoprécipitation: L'immunoprécipitation (IP) est la technique qui permet la précipitation d'un antigène (protéine) en solution par un anticorps qui agglutine spécifiquement une protéine particulière. 4. 1-Précipitation en milieu liquide (le test de l'anneau ou ring-test) On a deux types de précipités Ag-Ac : Selon l’aspect qualitatif (présence ou non d’Ag, d’Ac). Si on a suffisamment de précipité, on a la reconnaissance de l’Ag. C’est une réaction rapide (quelques minutes). Il faut toutefois une bonne quantité de sérum.
4. 1-Précipitation en milieu liquide (Cont.): Aspect quantitatif : c’est un phénomène de zone. -On étudie les différences entre les concentrations en Ag et en Ac. - On fixe l’anti-sérum (quantité fixe) et on fait varier la quantité d’Ag.
Zone 1 : on réalise une augmentation progressive de la concentration en Ag. Zone 2 : c’est une zone de stabilité. Zone 3 : quand il a trop d’Ag, on a une diminution de la quantité d’immunoprécipité.
IMMUNODIFFUSION
Immunoprécipitation ou immunodiffusion en milieu gélifié:
Introduction L’immunodiffusion est utilisée pour étudier les spécificités d'un Ac donné vis à vis de différents Ag (ou vice versa, d'un Ag donné vis à vis de différents Ac).
- Il existe plusieurs types de diffusion : - Réaction à diffusion simple : un seul des deux éléments diffuse. - Réaction à diffusion double : les deux diffusent.
Immunodiffusion radiale (technique de Mancini)
Test d’Ouchterlony
Immunodiffusion radiale (technique de Mancini)
- Cette méthode consiste à incorporer un antisérum spécifique dans la gélose et à déposer la solution d'Ag dans des puits. - A