Les bacteries

Pages: 7 (1622 mots) Publié le: 1 février 2013
Compte Rendu


ADRIEN

BAC PRO BIT TERMINAL 2012/2013
Sommaire :

* INTRODUCTION
* IDENTIFICATION DES BACTERIES (COLORATION DE GRAM, état frais) 
* Réalisation d’une dilution (10 -5).
* Réalisation d’un ensemencement d’un milieu.
* Réalisation d’un dénombrement microbienne dans une boite de pétrie.
* Examen macroscopique des Cultures.

INTRODUCTION
ORIGINE DESMICRO-ORGANISMES PRESENTS DANS UN ALIMENT :
Les micro-organismes des aliments ont 3 origines possibles :
-Ils préexistent dans la matière brute ou l’aliment avant toute manipulation ou transformation.
-ils sont apporté accidentellement lors des manipulations ultérieures de l’aliment.
-ils sont ajoutés volontairement.
EFFET SUR L’ALIMENT DES MICRO-ORGANISMES NUISIBLE :
Les micro-organismesnuisibles sont les micro-organismes pathogènes (salmonelles, staphylocoques, vibrio, …), responsables d’intoxications alimentaires et les micro-organismes pouvant causer des altérations des aliments.
* les altérations provoquées par les micro-organismes nuisibles se résument aux :
-altérations de l’aspect ou de la texture ;
-altérations du goût et de l’odeur ;
-altérations des qualitésnutritives.
PRINCIPES DE L’ANALYSE MICROBIOLOGIQUE DES ALIMENTS :
L’analyse microbiologique des aliments répond à deux nécessités :
* L’expertise : Elle permet de déterminer si un aliment est responsable d’une intoxication alimentaire.
* La prévention : Elle permet de tester un aliment pour savoir s’il est consommable du point de vue microbiologique, c'est-à-dire :
- s’il ne contient pasou pas trop de bactéries susceptibles de l’altérer, et s’il pourra être conservé selon certaines règles.

I. IDENTIFICATION DES BACTERIES (COLORATION DE GRAM, état frais).

Coloration de gram :
La coloration de Gram est la méthode de coloration la plus utilisée en bactériologie.
Elle permet de colorer les bactéries et de les distinguer à l'examen (le violet de gentiane (Gram +) ou lafuschine (couleur rose) (Gram -). Son avantage est de donner une information rapide sur les bactéries présentes dans un produit ou un milieu tant sur le type que sur la forme.
Mode opératoire :
* Réaliser un frottis 
* Fixer la préparation à la flamme, puis laisser refroidir la lame.
* Immerger les lames dans la solution de Violet de Gentiane pendant 1mm.
* Immerger les lames dans duLugol (2 fois pendant 30 seconde)
* Décolorer jusqu'à disparition de la couleur violette dans l'alcool en faisant couler goutte à goutte sur la lame inclinée pendant 45 secondes.
* Laver à l'eau.
* Contre colorer avec la solution de fushine pendant 20 à 30 secondes.
* Laver à l'eau et sécher à l'air.
* Observer à l’objectif X100, en immersion avec de l'huile.

Résultat :Ma coloration ne s’est pas bien déroulée, en faisant mon étude au microscope je n’ai absolument rien vu. J’ai dû recommence 3 fois, mais sans résultat bien plus probant.

Etat Frais :
Le but de l’examen à l’état frais consiste sur l’observation microscopique des bactéries vivantes. Cette méthode permet de mettre en évidence :
L’existence ou pas de germes.
* La morphologie des bactériesqui est l’une des principales étapes de l’identification bactérienne.
* La mobilité : une bactérie mobile doit se déplacer dans le champ microscopique avec un mouvement qui lui est propre. Cette mobilité ne doit pas être confondue avec le mouvement du fluide, appeler mouvement de BROWNIEN.
* Le mode d’assemblage c'est-à-dire comment elles sont disposées ; libre ou liées. Il est égalementpossible d’apprécier la quantité approximative des bactéries par champ microscopique. Ce renseignement peut être important, en particulier lorsqu’un isolement doit être effectué à partir du produit examiné.

Mode opératoire :
* Déposer une petite goutte d’eau stérile sur la lame.
* Prélever un morceau de colonies sur gélose.
* Faire une suspension homogène dans la goutte d’eau en...
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