Les puces à adn

563 mots 3 pages
1. Les puces à ADN.

Ces techniques sont utilisées dans la détection de mutation et le génotypage de polymorphisme dans les cellules cancéreuses. Elles permettent de détecter et quantifier la présence d’une séquence nucléique spécifique au sein d’un échantillon biologique, par exemple une séquence d’ADN spécifique au cancer. Les puces à ADN permettent donc de comparer l'expression des gènes de deux types cellulaires différents,

* On va prélever dans un premier temps chez un patient, de l’ARNm. On va effectuer ensuite la rétrotranscription grace à une enzyme spécifique : la transcriptase inverse. On prélève alors des fragments d’ADN de la cellule à analyser, susceptible d’être cancérigène. On y incorpore un fluorochrome vert. Un fluorochrome est un marqueur fluorescent de différentes couleurs.
On va ensuite faire de même en prélevant de l’ARNm sur un échantillon biologique contenant des cellules cancéreuses. On va cette fois marqué l’ADN avec un fluorochrome rouge. On obtient alors 2 types de culture.

* On va ensuite dénaturer l’adn des deux cultures : La dénaturation de l'ADN est un processus qui conduit à transformer un double brin d'ADN en deux simples brins, en rompant les liaisons hydrogène entre les bases azotées des deux chaînes complémentaires de l'ADN.
Cette dénaturation peut être réalisée in vitro en soumettant l'ADN à tout agent chimique ou physique capable de déstabiliser les liaisons hydrogène, comme le pH, la température, certains solvants, des concentrations ioniques élevées, des agents alcalins,...Cette dénaturation n’est pas irréversible.

L'hybridation de l’ADN est un principe de biologie moléculaire, fondé sur les propriétés d’appariement des bases complémentaires d'acides nucléiques. * On appelle sonde L’adn du patient contenant le fluorochrome rouge. On appelle cible l’adn que l’on a obtenu grace à l’échantillon biologique. On va fixer sur une lame de verre les sondes . La polylysine a pour rôle d'assurer la fixation

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