Eucaryotes

ADN

exon

Procaryotes
(bactéries)

ADN

transcription

ARN

transcription

ARNm traduction protéine

ARNm protéine traduction

ADN: double brin (A, T, G, C)
ARN: simple brin (A, U, G, C)
Protéines: acides aminés

Principes
ORGANISME
DONNEUR

Clonage et vecteur de clonage ou Technologie de l’ADN recombinant Extraction et coupure de l’ADN en fragment contenant de un à plusieurs fragments d’intérêt.

VECTEUR
Ou transporteur d’ADN.
C’est un fragment d’ADN capable de réplication autonome.

insertion individuelle de chaque fragment d’ADN dans une molécule de vecteur.

Obtention de l’ADN recombinant
Cours de Sophie Chauvet

Nouvelle combinaison de l’ADN d’un génome donneur (qui peut être de n’importe quel organisme) avec l’ADN d’un vecteur qui peut être d’origine complètement différente.

Obtention de l’ADN recombinant

Le clonage permet l’insertion d’un fragment d’ADN dans un vecteur permettant ainsi d’en obtenir plusieurs copies

An Introduction to Genetic Analysis

Procédure complète

Questions?
•Comment obtenir l’ADN de l’organisme donneur ?
Quelles informations porte cet ADN?
•Qu’est ce qu’une enzyme de restriction?
•Quels sont les vecteurs de clonage?
•Comment l’ADN d’intérêt et le vecteur sont-ils liés?
•Les cellules hôtes
•Comment l’ADN recombinant est introduit dans une cellule hôte et comment celle-ci se multiplie?
•Les intérêts du clonage?

Molecular Cell Biology

Obtention de l’ADN de l’organisme donneur

Ordre d’idée de la taille des génomes

A partir de l’ADN génomique (chromosomique):
L ’ADN génomique est obtenu à partir de lignées cellulaires, de tissus ou d’organismes entiers en fonction de la taille de l’organisme.
Pour un organisme donné on part de n’importe quel lot de cellules, l’ADN génomique sera le même.

Obtention de l’ADN de l’organisme donneur
A partir de l’ARN:

Nombre de gènes

Homme/Souris
3000 Mb
Nematode
97 Mb
Drosophile