TD IMMUNO S6 TECHNIQUES 2010 2011
Faculté des Sciences – Rabat
DÉPARTEMENT DE BIOLOGIE
Laboratoire de Biochimie-Immunologie
Filière SVI
Module de Biochimie – Immunologie (M22)
Elément : Immunologie
SEMESTRE 6
TD : TECHNIQUES IMMUNOLOGIQUES
Pr : BELLAOUI Hicham
Année universitaire : 2010-2011
I / TECHNIQUE DE PRODUCTION DES ANTICORPS
MONOCLONAUX
II/ IMMUNODOSAGE SANS MARQUEUR
A. LA RÉACTION D’AGGLUTINATION
B. LA RÉACTION DE NEUTRALISATION
C. LA RÉACTION DE PRÉCIPITATION
1- EN MILIEU LIQUIDE :
-IMMUNO NÉPHÉLÉMÉTRIE
-IMMUNO TURBIDIMÉTRIE
2- EN MILIEU GÉLIFIÉ :
- IMMUN DIFFUSION DOUBLE (OUCHTERLONY)
- IMMUN DIFFUSION RADIALE (MANCINI)
- ELECTRO-IMMNUNODIFFUSION (LAURELL)
- IMMUNOÉLECTROPHORÈSE
- IMMUN FIXATION
- IMMUNOCHROMATOGRAPHIE
III / IMMUNODOSAGES AVEC MARQUEUR
A – IMMUNOENZYMOLOGIE
- ELISA (DIRECT /INDIRECT/COMPETITIF/SANDWICH)
- TECHNIQUES DERIVES / WESTERNBLOT
B – IMMUNOFLUORESCENCE
- MARQUAGE : DIRECT /INDIRECT / SANDWITCH)
- TECHNIQUES DERIVES (CYTOMETRIE EN FLUX)
C - RADIOIMMUNOLOGIE
A CONSULTER :
HTTP://ISPB.UNIV-LYON1.FR/ETUDIANT/COURS_3A/TP3.PDF
HTTP://WWW.USS-LAOS.ORG/UMVF/CAMPUS-IMMUNOLOGIE/WWW.ASSIM.REFER.ORG/TECHNIQ.PDF
I / TECHNIQUE DE PRODUCTION DES ANTICORPS MONOCLONAUX
DÉROULEMENT DE LA PRODUCTION DES HYBRIDOMES
SELECTION
DES
HYBRIDOMES
TEST
DES
HYBRIDOMES
FUSION
DES
CELLULES
PRODUCTION
DES
HYBRIDOMES
ISOLEMENT
DES
HYBRIDOMES
OBTENTION
DES
CELLULES
HGPRT
Hypoxanthine
Voie exogène
AMP
Inosine MP
IMP
GMP
Azasérine
Aminoptérine
Synthèse endogène Aminoptérine
Thymidine
Thymidine Kinase
TMP
Milieu HAT : Hypoxanthine, aminoptérine, thymidine
Milieu Haza : Hypoxanthine, azasérine
A. LA RÉACTION DE PRÉCIPITATION
2 : EEN MILIEU GÉLIFIÉ :
2.1 IMMUNODIFUSION DOUBLE (OUCHTERLONY)
2.2 IMMUNODIFUSION LAURELL
2.3 IMMUNODIFUSION RADIALE (MANCINI)
2.3 IMMUNO ELECTRIIMMUNODIFFUSION
A – IMMUNOENZYMOLOGIE
TECHNIQUES DÉRIVÉS (WESTERN BLOT)
TECHNIQUES DERIVES DE LIMMUNOFLUORESCENCE (CYTOMÉTRIE EN FLUX)
FSC
Laser
Miroirs
dichroïques