TP2 : étude de l’hydrolyse enzymatique de l’amidon

Le but du TP est la préparation d’un empois d’amidon et la comparaison qualitative de l’hydrolyse acide et enzymatique de l’amidon. • L’hydrolyse chimique consiste a ajouter de l’acide chloridrique dans la préparation d’empois d’amidon a haute température, cela entraine l’hydrolyse des liaisons osidiques quelque soit leurs nature et leur positions dans le polymère • L’hydrolyse enzymatique l’α amylase est une endoamylase qui hydrolyse spécifiquement les liaison α(1….4) entre 2 d glucose quelque soit leur place dans la chaine d’amylose :toute fois elle ne peut hydrolyser 2 liaisons successives dans le polymère.

I .1 Principe de l’expérience :

Réaction du lugol : On utilise un réactif « iodo-ioduré » lugol pour visualiser la dégradation de l’amidon, le complexe coloré Iode et Polymère glucosidique est d’autant plus intense qu’il y a un taux de polymérisation importante.

Lugol si bleu : amidon (réaction avec l’amylose) Si jaune : glucose

Réaction Liqueur de Fehling : Permet d’identifier la présence de sucre réducteur, en effet les sucres réducteurs sont capables de réduire cuivrique (Cu2+) en ion cuivre (Cu+) Cela se voit par le passage d’une couleur bleu intense à une couleur rouge brique qui montre la présence de sucre réducteur

Concentration d’empois d’amidon

On a m= 2g V= 200ml
Application numerique
On sait que :C= m / V Soit C = 2/ 0,2 C=10g /L

c) quantitité de glucose libéré

|échantillons |0 |GLC témoin |H0 |H4 |E4 |
|Vol prélevé µl |0 |100 |100 |100 |100 |
|Vol H20 µl |100 |0 |0 |0 |0 |
|Vol GOD-POD µl |1000 |1000