TP2 Microbiologie I

I – Introduction

Dans ce TP, nous allons identifier des germes aérobies et aéro-anaérobies facultatifs grâce aux colorations de Gram et des tests comme l'oxydase, l'ONPG, des milieux en tubes et des milieux gélosés sur boîte de pétri.
Ces tests et techniques d'identification sont très présents dans le monde industriel dans de nombreux secteurs tels la pharmacie, la cosmétique, l'agro-alimentaire ou l'environnement.

II – Résultats

1) Identification de cocci à Gram (+)

Le test de coloration de Gram donne une coloration bleue pour le tube, le germe est donc bien Gram (+).
Au microscope, on peut observer que les bactéries sont de gros coccis de forme ronde et ils sont regroupés par petits groupe en amas ou en tétrade.
Le test de la catalase est positif (formation de bulles) et le test du type respiratoire indique que le germe est AERs (formation de colonies à la surface du milieu).
En conclusion, le germe de la souche N dans le tube est un Micrococcus provenant de l'environnement (cocci Gram (+), catalase (+), AERs).

2) Identification des germes présents sur boîte de pétri

Nous débutons par une coloration de Gram puis une observation au microscope, qui indique que les germes N1 et N2 sont des BG(-) par leur coloration rose (car constitués de nombreux lipides qui permettent la décoloration par l'alcool)
Pour nous guider dans les tests à faire, nous procédons au test de l'oxydase (chlorhydrate oxydé par l'oxydase donne une tache violette si test positif) en puis de l'ONPG (ONPG hydrolysé en galactose et ONP jaune si présence de la βGalactosidase) si oxydase (-).

Test N1 Interprétation N1 N2 Interprétation N2 Oxydase Coloration bleue Oxydase (+) Pas de coloration Oxydase (-) ONPG / / Positif
Β