TP 02 : Fixation de l’enzime sur son substrat :
Protocole 1 : Comment trouver l’origine de l’inactivité des molécules CPA ? utiliser RASTOP, parametrer celui-ci
Inserer la molecule CPA normal avec son substrat.
Inserer la molecule de CPA inactif avec son substrat.
Hypothèse : On va comparer les deux sequences et remarquer qu’elles sont différentes pour ainsi comprendre pourquoi la CPA est inactif.

4 ) A gauche : CPA normal A droite : CPA mutée

Le bleu correspond au squelette carboné.
Le rouge correspond au substrat GLY-TYR.
Le vert correspond aux acides aminés du site actifqui sont Tyr 248, Arg 145, Glu 270, Glu 72 et His 69.
On peut conclure qu’il y a moins d’atomes dans le site actif du CPA est inactif alors que quand elle est actif il y en a plus. Donc l’inactivité peut-être du a cette différence d’atomes.

Etape 2 bis :
Protocole 2 : Nous cherchons la différence entre una CPA active et une CPA inactive en examinant des modèles moléculaires avec le logiciel Anagène .
Etape 3 bis :
Après avoir comparé les séquences nucléotidiques on peut remarquer qu’ il y a deux différences :

On peut voir que la première mutation s’effectue a 205 et 206, les nucléotides A et C ont étaient remplacer par les nucléotides GG. Donc la protéïne Gly a subit une transformation a 69 et est devenu His sur la séquence mutée.

On peut voir que la deuxième mutation s’effectue à 742 et 743, les nucléotides T et A ont étaient remplacer par les nucléotides GG. Donc la protéïne Gly a subit une transformation a 248 et est devenu Tyr sur la séquence mutée.
Conclusion Générale du TP :
Grâce a nos recherches et nos données trouvées ont peut en conclure que vu qu’il y a des changements de nucleotides qui entraînent la mutation des protéïnes et donc qui sont responsable de l’inactivité du CPA.