UE2 : Méthodes d'études des cellules et des tissus

subcellulaire , adj., biol. Qui se situe en deçà de l'unité cellulaire. (Organites)

Techniques de fractionnement tissulaires et cellulaires et de culture cellulaire

I. Isolement et cultures des cellules

En fonction des objets sue lesquels on travaillera, les études porteront des noms différents : études in vitro : étude des cellules isolées d'un tissu études ex vivo : études des cellules d'organes entiers isolés et maintenus en survies études in vivo : étude d'un organisme entier vivant

A) Méthodes séparatives (études in vitro)
1.Méthodes de dissociation des tissus
Il existes des méthodes de dissociation des tissus car en effet, un tissu est composé de plusieurs types cellulaires.
a) Méthodes mécaniques

La dissociation ou la dissection des tissus peut se faire à l'aide d'un scalpel (=lame métallique portée par un manche, métallique ou en plastique, la lame est fixe ou amovible). En biologie cellulaire, on utilise surtout des scalpels à manche en plastique (matériel stérile à usage unique).

Pour un travail plus fin, plus précis on peut réaliser une microdissection. Il s'agit de travailler sous loupe binoculaire ou microscope à l'aide d'outils miniaturisés (scalpel, pinces, aiguilles...).
On utilise maintenant microdissection par un laser couplé à un microscope optique, c'est une microdissection laser. Cette méthode, très onéreuse, permet d'isoler des cellules une par une. Ce travail peut s'avérer long et fastidieux, mais efficace et irremplaçable.

b) Méthodes enzymatiques

La dissociation des tissus peut être efficacement effectuée par l'emploi d'enzymes qui hydrolysent la matrice extracellulaire (MEC).
La matrice extracellulaire désigne l'ensemble de macromolécules extracellulaires du tissu conjonctif et des autres tissus. Elle est constituée en grande partie de glycoprotéines et de protéines, ainsi que de glycosaminoglycanes. http://fr.wikipedia.org/wiki/Matrice_extracellulaire Les cellules vont se