MANIPULATION N° 1MANIPULATION N° 1
Amidon, amylase et fermentation alcoolique
L’amidon est un polyglucane (polymère de glucose) composé d’amylose et d’amylopectine. C’est un polymère de réserve accumulé sous forme transitoire dans les chloroplastes des tissus chlorophylliens ou sous forme plus durable dans des organes de réserve comme les tubercules ou les graines. Il sert de réserve glucidique pour la plante et fait l’objet de différentes utilisations alimentaires et non alimentaires. Les propriétés technologiques de l’amidon diffèrent suivant les proportions d’amylose et d’amylopectine.
L’amylase est un complexe enzymatique (-amylase, -amylase, phosphorylase) qui catalyse la dégradation de l’amidon en maltose, …afficher plus de contenu…

b. Extraction de l’amylase (1 préparation pour l’ensemble des binômes)

Peser 10 g de poudre de malt (orge germé), dans un erlen-meyer de 250 ml. Ajouter 100 ml de la solution de chlorure de sodium à 5‰ et agiter (agitateur magnétique) pendant 15 minutes. Transvaser la suspension dans deux tubes à centrifugation, équilibrer sur une balance et centrifuger 10 minutes à 5000 rpm. Le surnageant est dilué 10 fois (prélever 10 ml de surnageant et compléter à 100 ml dans une fiole jaugée à l’aide de la solution de chlorure de sodium à 5‰ ) et constitue ainsi la préparation enzymatique. c. Influence du temps sur le déroulement de la …afficher plus de contenu…

Mesure de l’activité Nitrate Réductase
Réactifs
Substrat (préparé) : On prépare, dans un erlenmeyer de 250 ml, une solution de phosphate 0,2 M, tamponnée à pH 7,5 en mélangeant :

- 19 ml de phosphate monopotassique KH2PO4 0,2 M (mesurés à l'éprouvette),
- 85 ml de phosphate disodique Na2HPO4, 12 H2O, 0,2 M (mesurés à l'éprouvette),
-100 µl de Triton X-100 (mesurés à la pipette),
- 1 ml de l-propanol (mesuré à la