Analyse d'un diholoside par chromatographie en phase gazeuse
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I. ButLe TP consiste à déterminer la structure d’un diholoside (maltose ou lactose) grâce à son analyse, après dérivation, en chromatographie en phase gazeuse (CPG).
II. Principes
Pour ce faire, deux grands principes seront utilisés au cours du TP : - la chromatographie en phase gazeuse ; - la dérivation des oses.
III. Résultats et interprétation
1. Bilan qualitatif
On utilise un témoin interne (acétate de mannitol) pour servir de référence car il est non présent dans les diholosides à étudier mais est de même nature et réagit donc de la même manière lors de la chromatographie. Les temps de rétention lus sur le chromatogramme vont donc tous être recalculés pour donner des temps de rétention relatifs au témoin interne.
2. Bilan quantitatif
Calcul des quantités injectées de chaque témoin :
On utilise un mélange d’acétate d’alditols obtenus par dérivation de mannose, galactose et glucose (formule brute C6H12O6) dont la concentration est de 5,184 mg/mL. On injecte 1 µL dans le chromatographe. D’où m(injectée) de chacun des oses simples = 5,184 . 10-3 mg = 5,184 µg.
3. Rendements
- Rendement d’hydrolyse RH :
Ce rendement est calculé à partir des quantités des oses obtenues après hydrolyse et celle du diholoside initialement utilisé.
- Rendement de dérivation RD :
Ce rendement est calculé à partir des quantités du témoin interne, le mannose.
- Rendement total RT :
Il existe deux méthodes pour calculer ce rendement.
Calcul à partir des quantités :
On utilise la quantité d’acétate d’alditol obtenue et celle du diholoside de départ.
Calcul à partir des rendements :
On fait le produit des rendements calculés précédemment.
IV. Conclusion
Le diholoside analysé était le