Analyses hplc
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TP 11 : Analyses HPLCI. Introduction aux méthodes chromatographiques
a) Définition :
La chromatographie est une méthode d’analyse qui est couramment utilisée pour la séparation, l’identification et le dosage des constituants chimiques dans des mélanges complexes. Il n’existe aucune autre méthode qui soit aussi puissante et d’application aussi générale.
b) Principe :
La chromatographie est une technique dans laquelle les constituants d’un mélange se séparent en fonction des vitesses auxquelles ils sont entraînés à travers une phase stationnaire par une phase mobile.
La phase stationnaire est une phase qui reste en place alors que la phase mobile est une phase qui se déplace sur ou au travers de la phase stationnaire en entraînant l’analyte avec elle.
La vitesse de déplacements des analytes dépend des interactions qu’ils ont avec la phase stationnaire et avec la phase mobile. Plus les interactions avec la phase stationnaire sont fortes, plus le soluté va rester longtemps sur la phase stationnaire. Plus les interactions avec la phase mobile sont fortes, plus le soluté sera entraîné vite.
c) Analogie :
Faisons une petite comparaison qui permette peut-être de mieux comprendre. Une fille et un garçon se promènent séparément dans une célèbre rue commerçante de Bruxelles. Un(e) ami(e) leur téléphone…
Les magasins = le support = phase stationnaire
La fille et le garçon = les analytes (ou solutés)
Ami(e) = le solvant = phase mobile
La fille a une certaine affinité pour les magasins et décide d’y passer un certain temps. Admettons qu’un observateur mesure le temps qu’elle passe « sur le support », c’est-à-dire le temps qu’elle va mettre pour sortir de cette rue commerçante. On peut considérer que son affinité pour les magasins est plus forte que celle du garçon et qu’il est donc logique qu’elle y passe plus de temps.
Il en est de même pour la chromatographie, les solutés fortement retenus par la phase