Autoradiograhie :
Une autoradiographie c’est une empreinte laissée sur un support photographique par un objet contenant un produit radioactif.

Objectif :
La technique d’autoradiographie a pour objectif de marquer une molécule spécifique avec de la radioactivité. Le marquage facilite la découverte de l’emplacement de la molécule.
La molécule qu’on recherche va être marquée par certains isotopes radioactifs*. Ceux-ci deviennent les marqueurs ou traceurs de la molécule dans la cellule.

Des cellules sont placées pendant quelques minutes dans un milieu contenant un précurseur radioactif. (Temps de pulse)
Ensuite ces cellules sont rincées afin d’éliminer tous les précurseurs qui n’ont pas été incorporés au sein d’une protéine. (Lavage) Après, ces mêmes cellules sont placées dans un milieu non radioactif pendant une durée variable.
(Temps de chase)On réalise ensuite des coupes ultrafines qu’on mettra sur une lame.

Ces coupes sont recouvertes d’une mince couche d’émulsion photographique de bromure d’argent afin de localiser la radioactivité.

Pendant le temps d’exposition, le rayonnement des précurseurs radioactifs incorporés dans les molécules nouvellement synthétisées réduisent les grains de bromure d’argent. Les préparations sont révélées (Révélation des grains d’argent) et observées au microscope électronique à transmission. Les grains d’argent indiquent les régions où sont localisées les molécules ayant incorporé les précurseurs radioactifs.

On peux utiliser cette technique pour mettre en évidence l’utilisation du dioxyde de carbone dans la photosynthèse. Les zones foncés qui correspondent à l’emplacement du carbone dans la feuille d’érable. On peut donc en déduire que la photosynthèse se fait en bordure nerveuse de la feuille.

(précurseur : élément de base qui s’incorpore dans des molécules nouvellement synthétisées.)