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BIOLOGIE CELLULAIRE

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BIOLOGIE CELLULAIRE

Ex : Compter le nombre de cellules cancéreuses dans notre sang.
Rq : L’analyse ne peut se faire que sur les cellules isolées
Rappels sur Immunofluorescence

669851281569
48895027305000
Cyto : cellule métrie : mesure

1 : passe haut de 500 nm
2 : passe bas de 600 nm
3 : passe bas de 550 nm

Il faut adapter l’échelle SSC en fonction des populations par exemple pour voir toute la population de granulocytes.
0000
Anticorps CD-19 ne va se mettre que sur les lymphocytes B.
1.1 % : lymphocytes B parmis les granulacytes
39.1 % lymphocytes B parmis les lymphocytes left28956000 Anticorps CD3 couplé marqueur fluorescent FITC (vert)
Anticorps CD19 couplé marqueur fluorescent PE (rouge)

Il y a pas que les anticorps qui peuvent être fluorecent pour étudier l’état de la cellule .Autres marqueurs cellulaires fluorecents :

Marqueurs de l’ADN : ils ne rentrent dans la cellule que si elle est perméabilisé (cad morte) = marqueurs de viabilité. Evaluer taux de mortalité cellulaire : état final de la mortalité des cellules. Autres fonctions du cycle cellulaire : pour savoir si la molécule induit la prolifération de l’ADN. Puisque c’est agent intercalant de l’ADN, il peut être un marqueur de la quantité d’ADN donc du nombre de chromosome.
Pour tuer les cellules => formol qui tue mais conserve sturucture. Lorsqu’elles deviennent pérméable on intégre les marqueurs fluorescents.

Témoins d’apoptose (perte du potentiel mitochondrial entraine la perte du marquage pour Rhodamine 123). Rhodamine est piégée dans le potentiel mitochondrial. Cellule non positive à le Rhodamine est en train de mourir.

CFSE : rentrent dans la cellule et reste collé de manière covalente.
Le lendemain des cellules se sont divisés donc chacune d’elles fluorescent moins.

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