Correction de l’exercice : VERIFICATION DE LA REPLICATION SEMI-CONSERVATIVE

Décembre 2008

Enoncé : Pour suivre le comportement des brins d’ADN au cours de la réplication, on utilise une molécule voisine de la thymine, la BRDU (Bromo-Désoxy-Uridine). Celle-ci peut s’incorpore à la place de la thymine lors de la réplication.
Cette molécule de BRDU est colorée par un réactif l’acridine :
Si la BRDU est présente sur les 2 brins de l’ADN, le chromatide devient orange après traitement à l’acridine.
Si la BRDU est présente sur 1 des 2 brins de l’ADN, le chromatide devient jaune après traitement à l’acridine.
Des cellules sont cultivées sur un milieu contenant de la thymine, sans BRDU. Après une métaphase, elles sont transférées sur un milieu sans thymine et avec BRDU, durant 2 cycles (tous les autres nucléotides étant présents).
Les cellules sont traitées à l’acridine. Le schéma montre l’aspect des chromosomes, tous semblables.
Aspect des chromosomes métaphasiques après traitement à l’acridine
Chromatide jaune

Chromatide orange
Centromère reliant les chromatides

Question : Montrez que cette double coloration des chromosomes confirme le mécanisme semi-conservatif, de la réplication. Des schémas explicatifs sont attendus.
Pour illustrer, utilisez la séquence suivante : … C – T – G – A – C – A …
…G–A–C–T–G–T…

REPONSE
Relevé du résultat : On voit des chromosomes ayant 1 chromatide jaune et 1 chromatide orange.

Interprétation du résultat : le texte nous informe de la signification des colorations :
 La couleur orange par acridine est due à la présence de BRDU sur les 2 brins du chromatide.
 La couleur jaune par acridine est due à la présence de BRDU sur 1 des deux brins du chromatide.

Le texte indique que la BRDU remplace la thymine dans les nucléotides.

Conclusion du résultat :
 Le chromatide orange possède de la BRDU sur les 2 brins : … C – B – G – A – C – A …
…G – A – C – T – G – T …
 Le chromatide jaune possède 1 brin seulement avec de la BRDU : … C – B – G –