TP : réaction de fixation du complément pour diagnostique de la brucellose
Sérum n°10
Principe :
Le principe de la réaction de fixation de complément et un titrage des anticorps de la brucellose, est de mettre en évidence si le sérum du patient a été en contact avec la brucellose.
- si le patient a déjà eu la brucellose, il possède alors des anticorps anti-brucellose. On met en contact le sérum du patient avec l’agent brucella, les anticorps anti-brucellose se fixent sur brucella : le complément se fixe sur anticorps anti-brucella, le complément est fixé = les hématies sédimentent.
- si le patient n'a pas eu la brucellose, il ne possède donc pas d'anticorps anti-brucella. On n’observe pas de réaction avec l’agent brucella, le complément reste libre. Le complément se fixe sur les anticorps anti-globules rouges = lyse des hématies.

Résultats :
Titrage du sérum hémolytique :
1/25 1/30 1/35 1/40 1/45
++ ++ ++ +++ +++
1/50 1/60 1/70 1/80 1/90
+++ +++ +++ +++ +++
1/100 1/120 1/140 1/160 1/180
+++ +++ +++ +++ +++
1/25 1/30 1/35 1/40 1/45
+++ +++ +++ +++ +++
1/50 1/60 1/70 1/80 1/90
+++ +++ +++ +++ +++
1/100 1/120 1/140 1/160 1/180
++ ++ ++ ++ ++
++++
Avec antigènes Sans antigènes Témoin GRS
On a réalisé la plaque sans antigènes.
Titrage des anticorps :
1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 Témoin sérum +
S S S S S HP HT HT
1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256 1/512 Témoin sérum X
S S S S S HT HT HT
1/8 Témoin sérum -
HT HT
S Témoin GRS
HT Témoin © 2U
HT Témoin © 1U
HP Témoin © 0,5U
HT Témoin Ag
S = Sédimentation
HP = Hémolyse partielle
HT = Hémolyse totale

509905-433070
Interprétation :
Titrage du sérum hémolytique :
À partir d'une concentration fixe en SH (Sérum Hémolytique) = 2u/25µL, on fait varier la concentration du complément [©] de 1/25 à 1/180, par méthode des dilutions en cascade.
Notre témoin GRS (Globules Rouges Sensibilisées) présente une sédimentation, il n'y a donc pas d'auto-hémolyse, ce témoin nous montre l’auto