Enzymologie : Calculs
Formules
Vi = k2 [Et] (en phase stationnaire)
Vm [S]
V = ----------Km + [S]
Présence d’un inhibiteur compétitif : K’m = Km (1+ [I]/Ki)
Présence d’un inhibiteur non compétitif : V’m = Vm /(1+[I]/Ki)
UI = µmol substrat/min
Katal = mol substrat/sec
AMS = mol substrat / (mol d’enz x sec) = k2
AS = AE / prot (mg)
Facteur de purification = ASf/ASi
→ attention aux unités !!!
→ attention aux dilutions !!! AEf = AEi x Vi/Vf (Vi/Vf = facteur de dilution ex : dilution 1/50) le plus souvent on veut retrouver l’AE initiale, après avoir fait les mesures sur la solution diluée : e AEi = AEf x Vf/Vi ex : pour la dilution au 1/50 : AEi = AEf x 50

Résolution de QCM
→ Activité enzymatique

• On constate après incubation de 30 minutes, en présence de 0,5 ml d’un sérum dilué 100 fois, une hydrolyse de 150 nmol de paranitrophénylphosphate, substrat de la phosphatase alcaline. L’activité phosphatase alcaline du sérum, exprimée en UI/L de sérum sera :
-3

150 . 10 µmol x 100 (dilution !)
AE = ------------------------------------------------ = 1000 UI/L
-3
0,5 . 10 L x 30 min

• L’activité d’une enzyme du sérum est de 3500 UI/L. Quelle est, après 30 minutes d’incubation, la quantité de substrat transformé par 0,5 ml de ce sérum dilué au cinquantième ? q µmol x 50 (dilution !)
3500 UI/L = -----------------------------30 min x 0,0005 L
3500 x 30 x 0,0005 q = ------------------------ = 1,05 µmol = 1050 nmol
50

• Le dosage de l’activité alanine aminotransférase du sérum d’un patient donne comme résultat à 37° 500 UI/L de sérum. Quel est à 37°C, le temps d’incubation
C,
nécessaire pour que 2,5 mL de sérum du patient transforme 1,35 mg d’alanine ? poids moléculaire de l’alanine : 90
3

(1,35 x 10 / 90) µmol
500 UI/L = ---------------------------------3 t min x 2,5 x 10 L
3

( 1,35 x 10 / 90) t = ------------------------- = 12 min
-3
500 x 2,5 x 10

Le tutorat est gratuit. Toutes reproductions ou vente sont