Hématologie

Pages: 12 (2900 mots) Publié le: 1 mai 2012
UFR D HEMATOLOGIE

LABORATOIRE D HEMATOLOGIE

Polycopié des travaux pratiques

2 année Pharmacie
ème

FEVRIER 2010

Polycopié des Travaux Pratiques d Hématologie 2ème année Pharmacie

1

Recommandations aux étudiants

-Il est impératif de respecter la répartition des groupes de TP -Le port de la blouse blanche et des gants en latex est obligatoire pendant les séances -Chaqueétudiant avant de quitter la salle doit nettoyer sa paillasse ainsi que le matériel utilisé en se reportant aux règles de sécurité affichées au laboratoire.

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Objectifs Pédagogiques

1. CYTOHEMATOLOGIE : -Effectuer un frottis sanguin -Colorer un frottis sanguin -Décrire les cellules sanguines au microscope optique -Savoirmesurer un hématocrite -Déterminer un taux de réticulocytes -Connaître la méthode de détermination d une vitesse de sédimentation. 2. HEMOSTASE : - Mesurer le temps de saignement par la méthode d Ivy - Réaliser le temps de Quik, le convertir en taux de prothrombine - Calculer l INR - Réaliser le temps de céphaline activé. 3. IMMUNOHEMATOLOGIE - Effectuer le groupage sanguin ABO D selon les épreuvesglobulaires et sérique - Savoir interpréter le résultat du groupage sanguin.

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CYTOHEMATOLOGIE

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Confection et coloration d un frottis sanguin
Principe Une goutte de sang, étalée de façon uniforme sur une lame de verre, permet d obtenir uneseule couche de cellules. Un tel frottis, après fixation et coloration, permet une étude morphologique des éléments sanguins, il peut révéler des anomalies. Matériel -Lames hématologique propres, dégraissées et sèches -Lamelle pour étaler (ou utiliser une lame à bord rodé) Technique : -Déposer une microgoutte de sang (capillaire ou veineux) à 1cm de l extrémité de la lame hématologique -Placer létaleur au devant de la goutte -Incliner l étaleur (30-45°), le sang suit alors l arête par capillarité, et aussitôt étaler d un seul geste en levant la main -Sécher rapidement à l air Coloration La coloration panoptique de May Grünwald Giemsa (MGG) repose sur l action complémentaire de deux colorants neutres May Grünwald (éosine et bleu de méthylène) et Giemsa (éosine et azurs de méthylène). Le MGfixe le frottis par son méthanol, le MG dilué au 1/2 dans l eau neutre colore les éléments acidophiles et les granulations différenciées. Le Giemsa surcolore les noyaux et colore les granulations azurophiles. *Technique : -Mettre les frottis dans un bac contenant du MG pur pendant 3min -Puis dans un bac avec MG dilué au 1/2 dans de l eau neutre pendant 2 min -Déposer ensuite les frottis dans un baccontenant du Giemsa dilué au 1/10 dans de l eau neutre pendant 20 min -Rincer et laisser sécher à l air *Résultats : -les noyaux sont rouge-violet ou rouge -les cytoplasmes acidophiles sont roses (polynucléaires et hématies) -les cytoplasmes basophiles sont bleus (lymphocytes) -les cytoplasmes polychromatophiles sont gris (monocytes) -les granulations neutrophiles sont violet lilas -lesgranulations éosinophiles sont orangées -Les granulations basophiles sont violet foncé -les granulations azurophiles sont rouges

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Corps

Queue

Tête

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Analyse morphologique des éléments figurés du sang
Cellules Globule rouge Polynucléaire neutrophilePNN Polynucléaire éosinophile PNE Taille 7µ noyau -Cytoplasme Beige orangé avec halo clair -rose ou clair granulations nombreuses, fines, violet lilas -légèrement bleu granulations volumineuses, nombreuses, rouge orangé brillant -légèrement rose granulations peu nombreuses, grosses, recouvrant parfois le noyau, violet foncé -très réduit, mince couronne bleue pas de granulations -clair, bleu ciel...
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