Correction du TP : HYDROLYSE DE L’AMIDON
Objectif : mettre en évidence le rôle des enzymes.
TP1 et TP2 : Comparaison de l'hydrolyse enzymatique à l'hydrolyse acide.
L'hydrolyse étudiée est celle de l'empois d'amidon (amidon cuit).
L'hydrolyse est une simplification moléculaire.
L'amidon (glucide complexe non réducteur de la LF) est simplifié en molécules plus petites, les sucres réducteurs (molécules réductrices de la LF).
Hypothèse : L'hydrolyse enzymatique (biologique) est différente de l'hydrolyse acide (minérale).
Protocole expérimental :
TP1 : hydrolyse acide
De l'empois d'amidon est placé à 100°C avec de l'HCl (pH acide)
TP2 : hydrolyse enzymatique
De l'empois d'amidon est placé à 37°C avec une enzyme (l'amylase).
Un tube témoin est réalisé avec absence d'enzyme.
Le suivi de l'hydrolyse se fait :
- en recherchant la présence ou la disparition de l'amidon (test à l'eau iodée).
- en recherchant l'absence ou l'apparition d'un sucre réducteur (test à la Liqueur de Fehling).
Résultats :
TP 1 : Hydrolyse acide de l'amidon
Test Temps 0 4 8 12 16 20
Eau iodée ++ ++ ++ ++ +- --
EA + HCl à 100°C
L de F -- -- -- -+ ++ ++
TP 2 : Hydrolyse enzymatique de l'amidon
Test Temps 0 3 6 9
Eau T1 : EA + iodée ++ ++ -- -- amylase à 37°C L de F -- -- ++ ++
T2 : EA + eau à Eau iodée ++ ++ ++ ++
37°C L de F -- -- -- --
Exploitation des résultats :
TP1 :
On voit que :
- Le test à l'EI est positif pendant au moins 16 minutes et devient négatif à partir de 20 minutes. (l'amidon disparaît).
- Le test à la LF est négatif pendant au moins 10 minutes et devient positif à partir de 12 minutes. (un sucre réducteur apparaît).
On en déduit que :
- Dès la 12ème minute un sucre réducteur apparaît, l'hydrolyse de l'amidon a commencé.
- Dès la 20ème minute tout l'amidon a disparu. L'hydrolyse est totale donc terminée.
TP2 :
On voit que :
- Pour le tube T1, les résultats sont les mêmes que dans le TP1, mais l'amidon a disparu en 6 minutes et le sucre