Amélie BARON
2ème année DUT chimie
Année 2014

Institut National de Recherche Agronomique
Unité de Recherches Avicoles
Equipe Fonction & Régulation des Protéines de l’œuf
Maître de stage : Dr Sophie Réhault-Godbert

Sommaire
Avant-Propos --------------------------------------------------------- P4

I Introduction-------------------------------------------------------- P5
I.1.L’œuf et ses propriétés------------------------------------- P5
I.1.A. Généralités---------------------------------------------------------- P5
I.1.B. Formation de l’œuf-------------------------------------------------P5
I.1.C. L’œuf, une ressource riche en protéines------------------------ P7

I. 2. L’ovalbumin-Related-Protein-X------------------------ P8
I.2.A. L’OVAX et l’Ovalbumine : deux molécules apparentées----- P8
I.2.B. Propriétés de l’OVAX ---------------------------------------------- P9
I.2.C. Variabilité génétique de l’OVAX et production de variants recombinants------------------------------------------------------------- P10

II Matériels et Méthodes----------------------------------- P14
II.1. Purification des recombinants de l’OVAX-----

P14

II.1.A. Préparation préliminaire des solutions tampons----------- P14
II.1.B. Purification par chromatographie d’exclusion HR100 -----P15
II.1.C. Purification par chromatographie d’échange d’anions (QSépharose)----------------------------------------------------------------- P17
II.1.D. Purification par chromatographie d’affinité (héparine sépharose)----------------------------------------------------------------- P19

2

II.2. Analyse par électrophorèse SDS-PAG

--------- P21

II.3.Analyse par Western-Blot----------------------------- P27
IIIRésultats / Discussion------------------------------------ P30
III.1. Purification de l’OVAX à partir du blanc d’œuf-------------------------------------------------------------------- P30
III.2. Purification des clones par chromatographie