le serotypage
Différencier les souches de microorganismes en fonction de leur composition antigénique (sérotype ou sérovar) grâce à une technique sérologique (qui utilise des anticorps).
Principe
La recherche est basée sur la mise en évidence d’une réaction spécifique entre un anticorps présent dans un sérum test et un antigène porté par le microorganisme étudié. Cette réaction est visualisée par une agglutination qui est le résultat macroscopique de la réaction antigène-anticorps.
e
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Les antigènes bactériens chez les GramPour les Entérobactéries :
¾ Ag somatique (de paroi) Æ Ag 0
(LPS)
¾ Ag de flagelle : Ag H
¾ Ag de capsule : Ag K appelé Vi chez
Salmonella.
Sérotypage de Salmonella
:
Salmonella Typhi, Paratyphi C et Dublin expriment lorsqu'elles infectent un organisme une micro-capsule portant l'antigène Vi qui masque l'antigène O et empêche le sérotypage. La bactérie arrête de synthétiser cette micro-capsule après quelques repiquages au laboratoire..
Non
Test d'auto agglutination sur lame (eau + colonie)
Test positif : le sérotypage est impossible, il faut réaliser un nouveau isolement
Test avec mélanges anti O : OMA, OMB et OMC
Si OMA +
Si OMB +
Groupe A, B, D, E ou L
Groupe C, F, G ou H
¾
¾
¾
¾
Tester anti O : groupe B : anti O 4,5 groupe D : anti O 9 groupe E : anti O 3,10,15 groupe A : anti O 1, 2
Tester anti O : le plus courant est le groupe C : anti O 6, 7, 8
OMA et OMB négatifs
Tester le sérum anti Vi
Positif :
Négatif :
Détruire
Vérifier qu'il s'agit l'antigène Vi par bien d'une Salmonelle chauffage 10' à et recommencer le
100°C et sérotypage recommencer le sérotypage. Tester les sérum anti H correspondants au groupe. On détermine ainsi le nom du sérovar. Attention le nom de genre et de sérovar portent une majuscule.
Exemple pour sérotypage de Salmonella Enteritidis :
Sérotypage d'Escherichia coli :
Pour la recherche d'E.coli enteropathogènes. Beaucoup moins fréquent en Europe actuellement.
Sérotypage basé