Les baculovirus
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Résumé Le vecteur de baculovirus est considéré comme un système d’expression puissant, on décrit ici un nouveau système de baculovirus pour le transfert et l’expression des gènes en utilisant une lignée de cellules « S2 » de Drosophila , génétiquement bien connue.
Le baculovirus recombinant construit, contient une EGFP (enheced green fluorecsent protein) sous le contrôle du promoteur polyhédrine, comme un marqueur de sélection fluorescent dans les cellules Sf21. Les baculovirus recombinats ont été utilisés pour la tranduction des cellules S2 avec une cassette de gènes cibles contenant soit une protéine de choc thermique de Drosophila « hsp 70 », ou une actine 5C, ou le promoteur metallothioniene.
Prés de 100% des cellules S2 montre une expression de gènes après infection par le baculovirus recombinant.
Le temps nécessaire pour une expression optimale de protéines est entre 24 à 36h après post infection. Ce qui est significativement plus court que l’expression des protéines sous le contrôle de polyhédrine dans les cellules Sf21.
Et les cellules S2 n’ont pas été lysées après infection et les niveaux d’expressions des protéines sont comparables à ceux sous le contrôle du promoteur polyhédrine dans la lignée des cellules lépidoptères. Autre avantages les cellules S2 permettent des infections répétitives par multiple baculovirus. Tout ça suggère que le système Baculovirus-S2 peut être utilisé comme un système pour le transfert et l’expression des gènes .
I- Introduction :
Le vecteur d'expression baculovirus (BEVS)utilisé chez les cellules d’insectes est universellement reconnue comme un outil puisant et polyvalent pour la production des grandes quantités de protéines recombinantes en raison de sa facilité d'utilisation, son haut niveau d'expression, et sa capacité d'incorporer des modifications post-traductionelle .Ce système baculovirus/cellules d'insectes classique pourrait être amélioré en éliminant le problème majeur qui est la lyse des cellules