mesure de volume sanguin chez le rat université cadi ayad
Sciences & Techniques du Languedoc
Licence Biologie des Organismes
Travaux Pratiques de Physiologie Animale :
Détermination du volume sanguin chez le rat
Le but de cette séance de travaux pratiques et de déterminer le volume sanguin d’un rat. Pour mesurer ce volume, on utilise une méthode de détermination indirecte. Cette méthode est basée sur l’injection d’une substance dans le réseau sanguin, après quelques minutes on mesure la concentration dans le sang de cette substance qui va nous permettre de déterminer alors le volume sanguin du rat. La substance utilisé ne doit pas modifier significativement le fonctionnement physiologique de l’animal, pour cela nous utilisons du Bleu Evans car cette substance et de pH neutre et ne modifie pas l’hosmolarité du sang de plus elle ne se diffuse pas hors du système circulatoire. I) Matériel & Méthodes :
1)
Préparation du rat :
La mesure du volume sanguin s’effectue sur des rats anesthésiés à l’uréthane (carbonate d’éthyle) à 5 % (2,5 ml / 100 gm de poids vif). Pour cette expérience nous devons mettre en place une voie pour l’introduction du Bleu Evans nous utilisons donc une canule insérée dans la jugulaire droite. Pour récupérer le sang après l’injection du Bleu Evans, nous devons introduire un cathéter
(contenant de l’héparine afin d’éviter la coagulation du sang) dans la carotide gauche, la circulation de la carotide doit être bloquée préalablement par une pince à artère.
2)
Injection du bleu Evans :
Une fois le cathéter et la canule installés, nous devons introduire dans la jugulaire 0,05g d’Bleu Evans pour 100g de poids vif. Nous disposons d’une solution mère à 0,025g/100ml et d’un rats de 312 g nous devons donc injecter 0,1826g de bleu Evans soit une injection de 0,73 ml de solution mère.
3)
Prélèvement du sang :
Trois minutes après l’injection on récupère 2ml de sang dans un tube contenant quelques gouttes d’Héparine. La récupération se