Contrôle de la teneur en tyrosine d'un médicament

L'étiquette d'un médicament indique une teneur de 500 mg de tyrosine par capsule.
La pureté du médicament sera vérifiée par chromatographie sur couche mince
La teneur en tyrosine sera déterminée par colorimétrie.

1. Étude qualitative par chromatographie sur couche mince

Solution T : mise en solution d'une capsule dans 1 litre de solution d'HCl 0,2 mol/L , puis filtrée.
1.1.Préparation des phases:

* Phase stationnaire:
Identifier une plaque de gel de silice
Marquer la ligne de dépôt à 1,5 cm du bord inférieur.
Réactiver les plaques de gel de silice à l'étuve à 110° C pendant 15 min.

*Phase mobile: (sous la hotte)
Mettre environ 8 mL de phase mobile dans une cuve et laisser saturer au moins 20 min.
Composition de la phase mobile: n butanol 4V acide acétique 2V eau 1V

1.2. Réalisation du chromatogramme:

Déposer en 3 fois, en séchant bien entre chaque dépôt:
*les témoins:

Tyrosine - Proline - Arginine - Acide glutamique.

*l' échantillons à analyser: solution T
Faire migrer dans la cuve à chromatographie.
Lorsque la phase mobile a atteint les 4/5 de la hauteur de la plaque, noter le front du solvant à l'aide d'un crayon de mine.
Laisser sécher la plaque.
Pulvériser de la ninhydrine sous la hotte.
Porter à l'étuve à 110°C pendant 10 min.
Déterminer les couleurs et les Rf de chaque dépôt.
1.3. Résultats :
Établir un tableau de résultats (Nom de l'échantillon, d, D, Rf , couleur)
Donner un plan de plaque.
Calculer les Rf de chaque tache.
Analyser la composition en acide aminé du médicament.

Sécurité:
Ninhydrine: Xn R: 22-36/37/38 S: -
Butanol : Xn, F ; R: 10-22-41 ; S:26
Acide acétique : C ; R:10-35 ; S:26-45

2. Dosage colorimétrique de la tyrosine par la méthode d'Anson

Principe :
En milieu alcalin le réactif de Folin Ciocalteu réagit avec la tyrosine en donnant une coloration bleue permettant un dosage colorimétrique.
Réactifs:
Solution E :