Les échanges cellulaires : Perméabilité des cellules à l'eau – Phénomènes osmotiques

Lors de ce TP, nous allons étudier la perméabilité de la membrane cytoplasmique à l'eau des cellules. Dans ce cas précis, on étudiera la perméabilité à l'eau des cellules d'oignons et de carottes. Pour ce faire, nous allons mettre en évidence le phénomène d'osmose qui est est un phénomène de diffusion de la matière mis en évidence lorsque des molécules de solvants traversent une membrane semi-perméables séparant deux solutions dont les concentrations en soluté sont différentes ; le transfert de solvant se fait alors de la solution la moins concentrée (milieu hypotonique) vers la solution la plus concentrée (milieu hypertonique) jusqu'à l'équilibre (milieux isotoniques).

Mesure de la pression osmotique du suc vacuolaire d'une cellule végétale par la méthode de la plasmolyse limite :

Étapes
Matériels
Méthodes
Justification
Préparation de la solution de macération
* 11 tubes à essais :
-saccharose (342 g/l)
- eau déminéralisée

* Pipettes 20 cc
Dilution
- croissante pour le saccharose
-décroissante pour l'eau déminéralisée
La dilution permet une meilleure observation du début de la plasmolyse
Prélèvement de l'épiderme
* Oignon
* Ciseau
* Pince
Section de l'oignon en deux. Prélèvement d'une écaille, et à l'aide de la pince prélèvement de 11 fragments d'épiderme interne.
Opérer rapidement afin d'éviter la mort des cellules.
Coloration des fragments
* Solution de rouge neutre à 1%
* Verre de montre

Plonger les fragments dans la solution de rouge neutre ( 1 à 1 ) pendant 30 secondes.
Le rouge neutre pénètre dans la cellule sans la tuer : c'est un colorant vital. Les vacuoles contenant le suc vacuolaire se colorent en rouge car le suc est acide.
Macération des fragments colorés
*Verre de montre
* Pipette Pasteur
* Solution de macération

Placer les fragments colorés dans les verres de montre contenant la solution de macération à des concentrations de saccharose croissante (30