UNIVERSITE HASSAN II AIN CHOCK Année universitaire 2013/2014
FECULTE DES SCIENCES AIN CHOCK
DEPARETEMENT DE BIOLOGIE

TRAVAUX DIRIGES DE BIOCHIMIE SV(4)
CINETIQUE ENZYMATIQUE

1) Que devient la valeur de la vitesse d’une réaction quand [S]= Km, 2Km, 4Km et nKm?

2) 2. Si la valeur de la vitesse maximale d’une réaction étant de 100 µmol/min et Km avec une valeur de 2mM, quelle sera la valeur de la vitesse de la réaction quand
[S]= 2µM et 2M ? en déduire la zone qui délimitera les différents types d’ordre cinétique enzymatique.

3) L’étude de l’activité de la trypsine sur la carbobenzoxylysine par-nitrophényl ester est suivie par mesure de la variation de la D.O. due à la libération du paranitrophénol.

Temps
(secondes)
24

48

72

96

120

168

240

312

450

600

D.O.
0,41

0,74

1

1,2

1,37

1,6

1,8

1,9

2

2

Déterminer l’ordre de la réaction
Déterminer la concentration du substrat initiale

4) Une enzyme fonctionne avec une constante Michaelienne de l’ordre de 5 mM. Pour 6 minutes de réaction, la moitié de la concentration en substrat utilisé au départ a été transformée. Calculer :

a- La constante de vitesse de la réaction

b- La vitesse maximale de réaction

c- La concentration du produit formé en 15 minutes de réaction pour les conditions suivantes : [S] = 2 mM et [S] = 1 M

5) La constante de Michaélis Km d’une réaction enzymatique est de 40µM. a- Déterminer les intervalles des concentrations pour les ordres 0 et un.

b- Avec [S]= 50 mM, on obtient une vitesse maximale de 80µM/min. Pour quelle concentration de substrat, la vitesse de la réaction est égale à Vmax/2. ?

c- Quelle sera l’influence d’une concentration double en enzyme sur les paramètres cinétiques de l’enzyme

d- Quelle sera l’influence d’une concentration double en substrat (celle qui a permis d’avoir Vmax) sur les paramètres cinétiques de l’enzyme.

5) Pour étudier la dépendance de la vitesse d’une réaction enzymatique catalysée par une enzyme vis-à-vis de la