RESUME

Le TP se déroule en grandes parties, la première est la purification de la prothrombine à l’aide de la précipitation au BaCl2 te de la chromatographie échangeuse d’ions , la deuxième partie à pour but de tester la stabilité de la thrombine par dénaturation à l’urée et fluorométrie.
Dans cette première partie, nous avons mis en évidence la forte présence de thrombine dans le plasma, puis après précipitation et centrifugation nous avons constaté la présence de thrombine dans les culots et son absence dans les surnageants. La chromatographie a permis de sélectionner, à partir de sang, une fraction contenant la protéine ce résultat a été vérifier par un test enzymatique.
La deuxième partie a permis de montrer qu’il y avait formation de complexe entre le thrombine et l’hirudine et que la formation de ce complexe permettait une augmentation de la stabilité de la thrombine. Nous avons aussi effectuer un travail informatique qui a permis le calcul d’une valeur de stabilité de la thrombine.
Ce TP a été pour nous une première approche avec le matériel utilisée en laboratoire.

INTRODUTION
La thrombine est une enzyme possédant la capacité de transformer le fibrinogène en fibrine. Le fibrinogène est le précurseur de nature protéique de la fibrine synthétisé par le foie. La fibrine est une protéine insoluble qui est à l’origine de la majeur parie des caillots sanguins. La thrombine est une enzyme qui est issue de l’activation de la prothrombine par la thromboplastine à conditions qu’il y ait des ions Ca2+ et d’autres variétés de protéines appelées accélérateurs.
La transformation du fibrogène en fibrine est la dernière étape du processus de coagulation plasmatique c'est-à-dire de la partie liquide du sang. Pour comprendre le processus faisant intervenir la thrombine, il est nécessaire de savoir, comme nous l’avons dit ci-dessus, qu’une autre protéine la prothrombine est à l’origine de la thrombine. En effet, en présence