BIA 2001- Groupe Jeudi Travail présenté à
Biochimie et Biologie cellulaire François Dallaire Arwa Ben Saâd

RAPPORT FINAL DE DE LABORATOIRE,

Par :
Dupont Louis-Benjamin (DUPL08089207) et Ranger Lydia (RANL21579306)

Université du Québec à Montréal
Département des Sciences biologiques
3 octobre 2014
Table des matières

Table des matières i
Table des tableaux et des figures ii
Résumé iii
Introduction 1
Matériel et Méthodes 5
Résulats 9
Observations microscopiques des fractions 9
Fractionnement cellulaire, matériel biologique et dosage protéique des fractions 10
Cinétique enzymatique 11
Gel d’électrophorèse 14
Discussion 16
CONCLUSION 20
Références 21
Annexe 1 : CINÉTIQUE ENZYMATIQUE : EXEMPLE DE CALCUL POUR L’EXTRAPOLATION POUR LES DONNÉES DE vmax, km et ki AVEC LE GRAPHIQUE 2 (P.12) 18

Table des tableaux et des figures
Tableau I : Dosage des échantillons de fractions cellulaire obtenus avec un spectrophotomètre de type Spectro thermo Scientifique, modèle Spectronic 2000, à une longueur d’onde de 610nm. 10
Figure 1 : Graphique de la courbe des vitesses (µM/sec) en fonction de la concentration du substrat (succinate) (M) avec et sans inhibiteur (malonate). 11
Figure 2 : Graphique de l’inverse des vitesses (µm/sec) en fonction de la concentration du substrat (succinate) (M) avec et sans inhibiteur (Malonate). 12
Tableau II : Tableau de l’activité enymatique C15K (100µl) versus les autres fractions, activité spécifique C15K(100µl) versus 100µl des autres fractions et répartition de la quantité total de protéines entre les différentes fractions. 13
Figure 3 : photographie du gel de polyacrylamide après migration à 100 volts et 200 volts pendant 1h30 et après coloration avec les 10µg d’échantillon des six différentes fractions 14

Résumé
Le but général de ce laboratoire fut de ce familiarisé avec différentes techniques et outils qui permettent l’étude de la cellule. Dans un premier temps, l’étalonnage