Séparation de l'alanine et de l'arginine sur résine échange

1726 mots 7 pages
TP1 : Séparation de l’alanine et de l’arginine sur résine échangeuse d’ions But : Le but de ce TP est de séparer un mélange de deux acides aminés, l’alanine et l’arginine, grâce à une chromatographie échangeuse d’ions, plus spécifiquement échangeuse de cation. Ensuite nous allons doser l’alanine éluée en réalisant une gamme étalon. Pour finir, nous allons mettre en évidence l’arginine grâce a l’alpha-naphtol et l’hypochlorite de sodium. Principe : Chromatographie échangeuse d’ions : …afficher plus de contenu…

Pour cela on utilise la loi de Beer-Lambert qui montre une relation de proportionnalité entre l’absorbance d’une solution et sa concentration, avec A = ε x l x C. Avec A l’absorbance (sans unité), ε le coefficient d’extinction molaire (en L.mol^-1.cm^-1), l la taille de la cube (en cm), et C la concentration de la solution (en …afficher plus de contenu…

Résultats : Nous allons commencer par voir les équilibres ioniques des deux acides aminés, l’alanine et l’arginine. Equilibre ionique de l’Alanine : (mettre l’équilibre) Equilibre ionique de l’arginine : (mettre l’équilibre) Le pH de la soude est : pH=14+log( C ) avec C=1mol/L pH = 14 Le pH de la soude a 1mol/L est donc de 14Pour calculer le pourcentage des acides aminés a différents pH, nous allons utiliser la relation d’Henderson-Hasselbach : pH=pka + log [base]/[acide] (démonstration formule, jusqu’à avoir [acide] = 100 / ((10^pH-pka) +1) et donc [base]=100-[acide] ) Ainsi à partir de cette formule nous allons pouvoir indiquer le pourcentage des différentes formes ioniques a différents pH, que nous allons synthétiser dans le tableau suivant

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