Tableaux récapitulatifs biochimie
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SEANCE 3 Préparation de la gamme étalon de BSA BSA (µg) BSA (µl) Tampon (µl) Bleu de C. (µl) Volume final (ml) 800 200 1 800 200 1 Blanc Blanc 2 8 792 200 1 5 20 780 200 1 8 32 768 200 1 11 44 756 200 1 15 60 740 200 1 19 76 724 200 1 23 92 708 200 1 25 100 700 200 1Absorbance de la gamme BSA pour la courbe étalon Extrait BSA BSA BSA BSA BSA BSA BSA BSA BSA BSA Quantité ( µl) 0 0 8 20 32 44 60 76 92 100 Absorbance
Absorbance des extraits et poids déterminé grâce à la courbe étalon Extrait EBWT EBWT EBWT EBOGM EBOGM EBOGM Dialysat Dialysat Dialysat FRP Dilution x10 x10 x10 x10 x10 x10 x10 x10 x10 0 Quantité (µl) 80 150 200 80 150 200 110 150 190 110 Absorbance 0,34 0,6 0,76 0,28 0,51 0,64 0,52 0,7 0,84 0,16
Activités Enzymatique des extraits Extraits EBWT EBWT EBWT EBOGM EBOGM EBOGM Dialysat Dialysat Dialysat FRP AE (µg.ml-1) 0,83 0,81 0,76 0,69 0,67 0,65 3,29 3,36 3,09 0,04 0,04 3,2 0,67 0,79 Moyenne d'AE (µg.ml-1)
Tableau récapitulatif Extraits AE(µmol.min ) Concentration protéique (µg.ml-1) AS(µmol.min-1.mg-1) Facteur de purification (NH4)2SO4 DEAE EBWT → Dialysat Dialysat + FRP 1,76 9,1
-1
EBWT 4,0.10
-2
Dia 3,0.10
-2
FRP 3,3.10
-2
EBOGM 4,0.10-2 8,2.10-1 6,7.10-1
7,9.10-1 5,1.10-2
3,2 9,0.10-2
Rendement de purification (%) (NH4)2SO4 70 DEAE 18,3
SEANCE 4 Volumes des extraits pour le gel dénaturant Extrait EBWT EBOGM Dialysat FRP Vi théorique (µl) 37,97 44,77 9,37 750 Vi pratique (µl) 32 32 9,37 32 Vtampon dénaturant 1x (µl) Vtampon5x (µl) 0 0 22,63 0 8 8 8 8