Techniques de biologie moleculaire

6356 mots 26 pages
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Module 7 Les techniques de l ’ADN recombinant: première partie
Où trouver l'information complémentaire? ☛ MCB-7, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, J. Sambrook, E.F. Fritsch, T. Maniatis, 1989, 2nd Edition, Cold Spring Harbour Press. ∴ Chronologie et dates importantes 1865 1869 1928 1944 1952 1953 1957 1961 1962 1966 1967 1970 1973 1975 1975-77 1981-83 1985 1990 Mendel propose le concept du gène et de la transmission héréditaire des caractères génétiques. Isolement de l'ADN pour la première fois par Friedrich Miescher. Griffith découvre le principe de la transformation bactérienne. Avery, McLeod et McCarty démontrent que l'ADN est porteur du message génétique. Hershey et Chase confirment les travaux d'Avery et convainquent la communauté scientifique. Watson et Crick proposent le modèle de la double hélice pour l'ADN. Kornberg isole l'ADN polymérase. Marmur et Doty mettent en évidence le principe de la dénaturation-renaturation de l'ADN, principe des techniques d'hybridation. Mise en évidence de la présence d'enzymes de restriction par Linn et Arber. Élucidation du code génétique par Nirenberg, Ochoa et Khorana. Découverte de l'ADN ligase par Arthur Kornberg. Démonstration par Hamilton Smith (Nobel 1978) que les enzymes de restrictions clivent l’ADN de façon séquence-spécifique. Utilisation des enzymes de restriction bactériennes pour couper et coller l'ADN dans des vecteurs plasmidiques par Boyer, Cohen et Berg. Transfert des ADN sur membrane, permettant l'hybridation par Southern. Mises au point des méthodes de séquençage par Maxam, Gilbert et Sanger. Souris, drosophiles et plantes transgéniques. Mise au point de la technique du PCR (amplification des gènes) par Mullis (Nobel 1993). Débuts des programmes de séquençage de génomes entiers.

Les technologies et découvertes majeures regroupées sous le vocable d'ADN recombinant incluent: 1) Le clivage spécifique de l'ADN grâce à des enzymes spécifiques, les endonucléases de restriction. 2) Le séquençage

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