MANIPULATION I : Introduction à la manipulation biologique

Introduction
Ce TP se déroule en 3 parties : la pesée et la mesure de volume, la dilution et la préparation d’une solution tampon.
Les solutions tampons sont très communément et universellement employé en biochimie car elles ont pour rôle d’assurer aux molécules biologiques, un milieu adéquat en terme de concentration ionique et pH principalement.
But
Se familiariser avec du materiel utilisé dans les laboratoires de biologie, de faire quelques calculs et d’apprendre les gestes les plus simples tel sue le pipetage, le mélange de solution et la pesée.
Principe
A. Pesée et mesure de volume
Une pesée peut être faite dans un bécher ou une coupelle. Une mesure de volume doit être faite à l’aide d’une pipette, d’une éprouvette u d’une fiole jaugée, cela dépend de la précision demandée.
Nous allons préparer 20 mL d’une solution 10 % saccharose et 0.01 % bleu de bromophénol (BBP). La concentration est exprimée en concentration massique pondérale/ B. Dilution
On a une solution de approximativement 0.3 M en saccharose et à partir de cette solution on en veut 3, une de 0.15 M une 0.06 M et une de 0.016 M en saccharose. (Le BBP sera aussi dilué il faut donc calculer sa concentration molaire et pondérale). On peut obtenir ces solutions par dilutions directes soit par une série de dilutions en cascades.

Dilutions directes : Concentration finale souhaitée | Volume de solution à 0.3 M (µL) | Volume H2O QSP 1 mL (µL) | Facteur de dilution | 0.15 M | 500 | 500 | 2 | 0.06 M | 200 | 800 | 5 | 0.015 M | 50 | 950 | 20 |

Dilution en cascade : Concentration finale souhaitée | Volume de solution à 0.3 M (mL) | Volume d’eau QSP 5 mL | Facteur de dilution | 0.15 M | 2.5 | 2.5 | 2 | Concentration finale souhaitée | Volume de solution à0.15 M | Volume d’eau QSP 5 mL | Facteur de dilution | 0.06 M | 2 | 3 | 2.5 | Concentration