Tp biochimie lipides

Pages: 8 (1882 mots) Publié le: 18 septembre 2013
TP 2 Biochimie : Analyse des lipides

Pendant ce Tp nous avons réalisé deux expériences sur différents lipides, deux purs connus, et l’un « complexe ». Les expériences nous ont permis de trouver l’indice d’acide et l’indice d’iode des lipides. En calculant parallèlement les indices théoriques, on a pu faire une comparaison, qui va nous permettre de déterminer l’état du lipide complexe.
Dansce rapport nous avons tout d’abord listé les compétences mises en œuvre dans ce Tp, ainsi que les précautions à prendre au niveau de la sécurité ; puis nous avons parlé des deux indices que nous avons étudiés. Dans un dernier temps nous avons évoqué l’état physique des corps gras.

I. Compétences expérimentales mises en œuvre

Ce TP nous a permis de réutiliser des connaissances techniques quenous avions déjà utilisées, ainsi que d’en mettre de nouvelles en œuvre.

Ce que nous avions déjà fait : - faire des pesées précises
- utiliser une burette graduée et la conditionner
- pipeter des solutions
- utiliser l’agitateur magnétique

Ce que nous avons fait pour la première fois : - utiliser des solvants apolaires
- pipeter des solvants apolaires (en commençant parremplir/vider la pipette une ou deux fois)
- utiliser une vaisselle sèche
- recouvrir les contenants de parafilm afin d’éviter la dissémination des vapeurs des solvants

II. Sécurité

L’utilisation de solvants apolaires va nécessiter également des nouvelles précautions au niveau de la sécurité. En effet, les vapeurs des solvants sont très inflammables, ils sont donc utilisés sous lahotte, et doivent rester éloignés des sources de chaleur. Nous avons également utilisé l’acétate mercurique, composé dangereux car il peut être mortel par ingestion. Il sera également manipulé sous la hotte. De plus, une fois les solutions préparées sous la hotte, nous les bouchions avec du parafilm afin d’éviter les disséminations. Enfin, les solvants doivent être recyclés, ils sont donc récupérésdans un bidon.


III. Manipulation 1 : détermination de l’indice d’acide

• Le but de la manipulation est de calculer l’indice d’acide IA . L’indice d’acide est le nombre de mg de KOH (potasse) nécessaires pour neutraliser les acides libres de 1g de corps gras.

• L’équation de la réaction est :
KOH + R-COOH → R-COO- + H2O + K+

• Principe : Lorsqu’on dissous le corps gras dans lesolvant, le pH devient acide puisque les fonctions acides se détachent du corps gras. L’ajout de KOH va rendre le pH neutre puisqu’il va neutraliser petit à petit toutes les fonctions acides. C’est la phénolphtaléine qui va nous permettre de voir à quel moment toutes les fonctions sont neutralisées : cet indicateur coloré est incolore en milieu acide, et vire au rose en milieu basique. Au moment oùle virage a lieu, c’est donc que tous les acides ont été neutralisés. On obtient un volume de chute de burette, grâce auquel on va pouvoir calculer l’indice d’acide.

Evolution du pH en fonction du temps :

• Manipulation : Nous avons tout d’abord dissout une masse connue de corps gras dans 10mL de solvant lipide (mélange d’éther et d’éthanol déjà prêt), puis nous avons ajouté une goutte dephénolphtaléine. On titre ensuite cette solution à l’aide du KOH à 0.1 mol/L (M). Nous avons réalisé cette expérience avec :
- 1g de glycérol trioléate
- 0,4 g d’acide oléique
- 1,01g d’huile d’olive

•Chutes de burette obtenues :
-pour 1g de glycérol trioléate : 0.3mL
-pour 0.4g d’acide oléique : 15.4mL
-pour 1.01g d’huile d’olive : 0.1mL

• Calcul de l’IA
Il s’agit tout d’abord detrouver le nombre de moles de KOH, nKOH, qu’on va utiliser dans les calculs :
nKOH = [KOH] x VKOH
= 0,1 x VKOH

Et on sait que nKOH = mKOH / M(KOH) donc mKOH = nKOH x M(KOH)
mKOH = nKOH x 56

L’IA correspond à la masse de KOH, donc IA = mKOH (en mg)

Pour le glycérol trioléate :

IA calculé: 1g → 0.1mL0,1→ 0.1 nKOH = 0,1 x 0,1.10-3 = 1.10-5mKOH = 1.10-5 x...
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