1- Introduction
La gliadine est l’une des molécules allergéniques contenu dans différents types de céréales, elle est à l’origine de la maladie cœliaque dont le seul traitement est un régime stricte sans gliadine. La législation tolère 100 ppm de gliadines, haut de la de cette valeur le produit est considéré comme dangereux pour les gens atteints de cette maladie. D’où l’intérêt du dosage de cette molécules dans les aliments suspects.
Notre but dans ce TP est de tester l’efficacité d’une méthode immunométrique (avec l’utilisation d’anticorps polyclonaux) pour le dosage de la gliadine dans quatre farines d’origines différentes.
Afin de valider cette méthode on utilise certains facteurs qui agissent sur la limite de détection

Etalon
Gluten
Echantillons

Dilution 10-4
Dilution 10-3
Dilution 10-2
Dilution 10-1
Solution mère
1
2
3
4
Concen-tration
(mg/l)

0

0.25

2.5

25

250

2500

Lumine- scence (RLU)

2,4 .106

5,3.106

8,3.106

39,1 .106

116,7 .106

154,4 .106

11,8 .106

4,3 .106

20,3 .106

2,2 .106
2- Résultats

3- Courbe étalon

4 -Limite de détection (LD) du teste dans la solution éthanol/eau
Bruit de fond = 2.4 106
2 x bruit de fond = 4.8 x106 RLU avec la projection sur l’axe des abscisses

5 - Limite de détection du teste dans la farine (LDs) Facteur de dilution = 100
LDs = 0.19mg/l = 19 mg/kg=19 ppm
Cette valeur est compatible avec le contrôle de qualité puisque elle est inférieure à 100ppm.
6- RLU permettant de classer la farine lors du contrôle qualité 100ppm
100ppm=100mg/kg=1mg/l
Avec la projection sur l’axe des ordonnes on trouve

7- Concentrations (c) de gliadine dans les farines et la classification selon le critère de qualité Echantillon1: C1= 4.1mg/l = 410ppm > 100ppm farine riche en gliadine donc pas bonne
Echantillon2: C=0.125mg/l = 12.5ppm <