ELECTROPHORESE DES
HEMOGLOBINES SUR BANDES
D’ACETATE.
PROTOCOLE EN IMAGES

Introduction
• L'électrophorèse est une technique biochimique de séparation fondée sur le fait que des molécules portant des charges électriques différentes migrent à des vitesses différentes lorsqu'elles sont placées dans un champ électrique.
• Si l’idée d’utiliser cette caractéristique pour séparer des molécules remonte à la fin du dix-neuvième siècle, c'est le biochimiste suédois Arne Tiselius
(1902-1971), prix Nobel de chimie en 1948, qui réussit le premier à séparer par cette technique les protéines contenues dans des liquides biologiques complexes comme le sérum sanguin et le lait. Aujourd’hui, l’électrophorèse est devenue une technique de routine dans les laboratoires où on l’utilise pour séparer notamment les protéines et les acides nucléiques.

L'hémoglobine est le pigment respiratoire de tous les vertébrés. Elle est chez eux contenue dans des globules rouges, cellules auxquelles elle donne sa couleur. Ces cellules sont aussi appelées hématies ou érythrocytes. L'hémoglobine est également présente chez de nombreux invertébrés, soit dans des cellules sanguines, soit en solution dans le sang.
L'atome métallique intervenant dans la fixation de l'O2 est ici le fer. Chez les vertébrés, les hémoglobines sont formées de l'association d'un nombre variable de monomères constitués d'une protéine, la globine, associée à un hème.

Hème

Trempage et essorage 1. Mettre à tremper les bandes d'acétate de cellulose dans le tampon d'électrophorèse
(tampon trisvéronal) pendant 10 à 20 minutes.
2. Essorer l'excès de tampon en plaçant les bandes entre deux feuilles de papier absorbant
(essuie-tout

Mise en place de la bande sur le support
3. Placer la bande sur le portoir en veillant à disposer la face absorbante vers le haut.
La bande doit être tendue et ses extrémités doivent dépasser suffisamment pour tremper dans le