Zerer

Pages: 4 (819 mots) Publié le: 26 février 2013
Dosage du lactose du lait par la méthode au DNS


1. Préparation de l’échantillon:


Introduire dans une fiole jaugée à 100 mL:
– 2 mL de lait UHT
– 1 mL d'acide trichloracétique (3mol/L)
– Laisser reposer 10 minutes
– Neutraliser avec 6 mL de NaOH (1 mol/L)
– Compléter et ajuster avec de l'eau distillée.
Filtrer pour obtenir le filtrat L

2. Dosage des sucresréducteurs par colorimétrie au DNS:

Les glucides réducteurs peuvent être dosés grâce à leurs propriétés réductrices, en milieu alcalin et à chaud, vis-à-vis de l'acide 3-5 dinitrosalicylique(3,5-DNS).
La réaction est non stœchiométrique, donc dépendante des conditions opératoires.
Par conséquent on opérera par référence à une gamme d'étalonnage.
Le 3,5-DNS jaune estréduit en acide 3-amino-5-nitrosalicylique orangé-rouge, dosable par colorimétrie à 530 nm.


Le développement de la coloration à 100 °C et les mesures d'absorbance devront être menéssimultanément pour les essais et les étalons.


2.1.Méthodes générales de préparation des solutions colorées

Dans un tube à essais, verser:
▪ v mL de solution apportant les sucres àdoser
▪ qsp 3 mL d'eau distillée
▪ 2 mL de réactif au 3,5-DNS


– Boucher les tubes et les porter au bain-marie à 100°C pendant 5 min exactement.
– Refroidirsous un courant d'eau froide (ou dans un bain d'eau froide).
– Ajouter 15 mL d'eau distillée.
– Mesurer les absorbances à 530 nm contre un blanc.



2.2.Préparation de la gammed'étalonnage :

– Préparer par pesée 100 mL de solution étalon de lactose monohydraté à 2 g/L.
– Préparer une gamme d'étalonnage de 6 tubes contenant de 0 à 2 mg de lactose monohydraté partube à partir de la solution étalon réalisée.


2.3. Traitement des échantillons :

Doser les sucres réducteurs sur les échantillons L, sur d'éventuelles dilutions (pour cela se référer à la...
Lire le document complet

Veuillez vous inscrire pour avoir accès au document.

Devenez membre d'Etudier

Inscrivez-vous
c'est gratuit !