Exercices de chromatographie :
Exercice 1 : On détermine les temps de rétention (tr) au cours d'une chromatographie sur
Sephadex, des protéines suivantes dont on connaît la masse moléculaire (MM) (Le débit de la colonne est de 5 ml / min) :
MM tr (min)
Aldolase 145000 10,4
Lactate déshydrogénase 135000 11,4
Phosphatase alcaline 80000 18,4
Ovalbumine 45000 26,2
Lactoglobuline 37100 28,6
1 - Calculer les volumes d'élution (Ve) correspondants. Porter le log de MM en fonction de Ve -
Que remarquez-vous …afficher plus de contenu…

(On considérera que les interactions protéine-DEAE-cellulose sont uniquement de type électrostatiques). Correction exercice 4 :
1 - Proportion des groupements diéthylaminoéthyls (DEAE : pKa = 9,4) chargés négativement aux pH : 2, 7, 9,4 et 12.
Le pH est donné par la relation suivante :À pH = 2 : = pH - pKa = 2 - 9,4 = -7,4 donc : = 3,98 10-6
Sachant que (A) + (B) = 100 % et que (B) = 3,98 10-6.(A), on en déduit que (A) + 3,98 10-6.(A) = 100
(A) est mis en facteur : (A) = 100 /(1 + 3,98 10-6)
On peut ainsi calculer le pourcentage des formes (A) et (B) : (A) = environ 100 % et (B) = 0 %
À pH = 7 : = pH - pKa = 7 - 9,4 = -2,4 donc : = 3,98 10-3
Sachant que (A) + (B) = 100 % et que (B) = 3,98 10-3.(A), on en déduit que (A) + 3,98 10-3.(A) = 100
(A) est mis en facteur : (A) = 100 /(1 + 3,98 …afficher plus de contenu…

En fonction de quel(s) critère(s) les différents composés vont-ils être séparés ?
2 - Ecrire la réaction mettant en jeu les TG et la lipase pancréatique.
3 - Analyser le chromatogramme ci-dessus. Est-ce que la réaction de lipolyse est totale ?
Exercice 15 : Un corps gras naturel, constitué d'un mélange de triglycérides (TG) est analysé en chromatographie sur couche mince. La plaque de gel de silice est uniformément imprégnée de nitrate