Analyse D Une Electrophorese

1. Principe général et grandeurs fondamentales La séparation des composés par électrophorèse capillaire résulte de deux mécanismes de transport, l’électromigration et l’électroosmose. 1.1 Électromigration L’électromigration résulte du déplacement d’une espèce chargée lorsqu’elle est soumise à un champ électrique. La vitesse linéaire acquise (ou vitesse électrophorétique) est alors fonction du champ électrique et de la mobilité électrophorétique de l’ion selon la relation suivante : vep

2009-2010 Analyse de pesticides dans l'alimentation Le thiabendazole dans les fruits Introduction : Les Pesticides • Les pesticides utilisés pour : – détruire les mauvaises herbes – protéger les végétaux contre les organismes nuisibles – assurer la bonne conservation des produits végétaux • Répartis en grandes familles chimiques : - les organochlorés - les organophosphorés - les pyréthrinoïdes - les carbamates • Effets néfastes sur la santé ? www.infos-pesticides.org 2

aurez produit plusieurs fragments d’ADN de tailles différentes. 2- Digestion d’un plasmide (pBluescript) avec Eco R1 et Hind III. Vous allez cloner les fragments de l’étape 1 dans ce plasmide. 3- Inactivation des enzymes de restriction. 4- Analyse par électrophorèse sur gel d'agarose des fragments d’ADN produits pendant les digestions 1 et 2. 5- Ligation des fragments produits dans l’étape 1 dans le plasmide, utilisant une ligase (une « colle moléculaire »). 6- Introduction des molécules recombinantes

des ADN 1.2.Extraction des ARN 1.3.Extraction des 1.3.1. Rappel sur les plasmides plasmides 1.3.2. Purification par Lyse alcaline 1.3.3. Purification par Gradient de chlorure de césium 2.Séparation des acides nucléiques 2.1.Electrophorèse sur gel d’agarose 2.2.Electrophorèse sur gel de polyarylamide 3.Elaboration de Cartes de restrictions des 1.Purification des acides 1.1.Extraction nucléiques de =technique l’ADN permettant d'isoler l'ADN de cellules ou de tissus. L'ADN extrait  digestion

bactéries et on fait une digestion par des E.R des plasmides que l'ont vient de purifier. En conclusion de ce TP on devrait obtenir des fragments d'ADN lambda clonés. RESULTATS ET DISCUSSION Analyse par électrophorèse de fragments d'ADN: Le TP de bio 57 est composé de deux analyses par électrophorèse sur gel d'agarose. L'électrophorèse en gel est utilisée pour séparer les macromolécules biologiques en fonction de leurs tailles et de leurs charges électriques. Le gel est constitué d'une matrice

contenant le plasmide est ensuite possible : il s'agit pour cela de les cultiver au sein d'un milieu contenant l'antibiotique auquel elles sont résistantes grâce au gène apporté par le plasmide. III/ Les résultats A. Digestion enzymatique et électrophorèse Les enzymes de restriction sont des enzymes capables de couper un fragment d'ADN au niveau d'une séquence de nucléotides particulière appelée site de restriction. Chaque enzyme de restriction reconnait un site de coupure particulier, au niveau

Compte rendu du TP : électrophorèse de protéines, électrotransfert et immunorévélation But : L’objectif principal de ce TP est l’analyse par électrophorèse des protéines récupérées dans différentes fractions lors du TP consistant à extraire une molécule d’intérêt, le lysozyme, du reste des protéines d’un blanc d’œuf. Principes : - Electrophorèse : il s’agit d’une méthode qui permet de séparer et de caractériser des molécules. Elle se base sur le déplacement de molécules chargées sous l’effet d’un

Les AGL ont été purifiés à partir du lipolysat par chromatographie échangeuse d'anions. Cette chromatographie permet, outre la fraction AGL, de purifier une seconde fraction constituée de glycérides neutres (GN). Différents échantillons ont été analysés en chromatographie sur couche mince (gel de silice). Le mélange de solvant utilisé, de polarités différentes, étant : éther de pétrole / éther diéthylique. Les dépôts effectués sont : 1 : Témoin Triglycérides (TG)2 : Témoin 1, 2-Diglycérides et 1

Passage de l’électrophorèse sur gel à l’électrophorèse capillaire Dr Maurice Schmidt ADMED Analyses et diagnostics médicaux Neuchâtel-La Chaux-de-Fonds www.admed-ne.ch L’électrophorèse, une longue histoire de supports •  •  •  •  •  •  •  •  En veine liquide (Tiselius 1930) Papier filtre (membrane) Acétate de cellulose (membrane) Amidon (milieu gélifié) Agar-agar (milieu gélifié) Agarose (milieu gélifié) Polyacrylamide (gel) Capillaire de silice (veine liquide, ∅ < 100 µm, l: 8 cm) www

quotidiennement (l'insuline par exemple, utilisée par de nombreuses personnes). Pour réaliser ce clonage moléculaire nous avons réalisés plusieurs étapes importantes telles que la digestion enzymatique, insertion dans un vecteur de clonage (plasmide), électrophorèse, extraction de l'ADN,... Introduction : Le clonage est la multiplication en grand nombre d'un gène, d'un organise ou d'une cellule souche. Il est très important de nos jours, en effet il nous permet d'obtenir en grande quantité un gène